金针菇生活史各阶段核相的研究.pdfVIP

摘 要 金针菇Flammulina 膨瑚菌科、小火焰菌属的一种真菌，是一种在全球均广受欢迎的著名 的食药用真菌。到目前为止，关于金针菇的一系列生物学特性的研究 及其食药用价值在国内外均有相关的研究，但关于金针菇整个详细生 活史的报道研究相对较少。本论文对金针菇生活史各阶段的核相及出 菇机理进行了较为全面的研究，主要内容及结果如下： 1．金针菇生活史各阶段的人工培养 本实验通过进一步的研究改良并优化了最适宜金针菇栽培的条 件，同时观察了其生活史各个不同阶段的生长发育情况，观察不同菌 株子实体产生孢子的情况，并且收集不同菌株的孢子进行萌发交配实 验。实验结果得出：金针菇的菌丝在形成初期均为白色，但随着菌丝 的不断繁殖生长，不同菌株的菌丝表面会分泌出黄褐色的色素；发育 成熟的异核体菌丝及部分同核体菌丝可扭结产生原基，继而发育成为 子实体。实验结果表明异核子实体能产生担孢子，担孢子可以萌发， 发育为菌丝体；少数同核体菌丝也可以产生子实体，但子实体呈畸形， 后期不产生孢子。 2．金针菇生活史各阶段的形态解剖学观察 取金针菇的菌丝体、子实体和担孢子，制作临时装片，用刚果红 溶液染色，普通光学显微镜下观察，结果表明：金针菇同核体菌株均 无锁状联合，子实体担子上不产生担子小梗，不产生孢子；两不同极 性的单核菌丝进行交配形成次级菌丝，有明显的锁状联合，形成的子 T 实体的担子上含有4个担子小梗，最后担孢子从小梗上脱落。单核菌 丝和双核菌丝都能产生粉孢子。 对金针菇生活史各阶段的菌丝体、子实体、担孢子等进行荧光显 微观察研究。结果表明：金针菇单个担孢子发育而来的同核体菌丝为 单核，无锁状联合，部分单孢菌株能形成同核子实体，同核子实体的 原担子中只有1个核，该核在担子中进行一次有丝分裂形成纵向排列 的2个子核，担子发育停止，同核子实体不产生担孢子；具有可亲和 交配型的单孢菌丝经过质配形成异核体菌丝，异核体菌丝双核，具有 锁状联合，能形成异核子实体，异核子实体的原担子中具有2个核， 这2个核经过核配融合为1个二倍核，二倍核在担子中进行减数分裂 形成4个单倍子核，4个子核分别进入4个担孢子中，随着担孢子继 续发育，其中的单核再进行一次有丝分裂，成熟担孢子为双核，但这 2个核是同质的。由单核菌丝和双核菌丝产生的粉孢子为单核。 3．SNPs单核苷酸多态性在金针菇生活史研究中的应用 本实验通过构建金针菇基因组文库，设计了17对引物，并分析 得到了117个SNPs位点。并用这17对引物对不同采集地及不同生长 发育时期的金针菇样品进行PCR扩增并测序。SNPs分子标记对金针 菇生活史各阶段的核相进行了分子检测。分子标记还证实单核体菌株 在栽培出菇的过程中可能会被其它菌株的粉孢子或担孢子污染而变 成异核体菌株。 根据以上研究结果，我们构建了完整的金针菇生活史：双核孢子 萌发形成单核初生菌丝，少数初生菌丝能出菇形成同核子实体，同核 II 子实体担子为双核，不产生担子小梗，不产生孢子；两个不同极性的 初生菌丝交配形成次生菌丝，次生菌丝形成异核子实体，子实体担子 含有4个担子小梗，最后孢子从小梗上脱落。单核菌丝和双核菌丝均 能产生具有单核的粉孢子。 关键词：金针菇，同核体，异核体，分子标记，荧光染色观察 ABSTRACT Flammulina whichis anedibleandmedicinal velutipes to basidiomycete，belongsFlammulina，familyPhysalacriaceae． is intheworld．So Currently,Flammulinavelutipesverypopular far,the characteristicandmedicinalvalueofFlammulina biological velutipes