壳聚糖对断奶仔猪免疫功能的影响及调节机制研究.pdf

本研究由国家自然科学基金项目资助 项目编号： 摘 要 本论文共分6个试验研究了壳聚糖对断奶仔猪免疫功能的影响及其免疫调节的机 制。试验1-4幂t]用体内法，采用单因子随机区组设计，将180头28日龄断奶的、体型外 貌相近的、健康的(杜×大×长)三元杂交仔猪随机分为5个日粮处理组，每个处理组 6个重复，每个重复(栏)6头(3栏公猪、3栏母猪)。5种试验日粮是在基础目粮中 分别添加0、100、500、1000和2000 mg／kg的壳聚糖配制而成。试验期为28天，在试 验期间仔猪自由采食、自由饮水。试验l研究了壳聚糖对断奶仔猪体液免疫和细胞免 疫功能的影响。试验2研究了壳聚糖对断奶仔猪应激激素水平及抗氧化酶活力的影响， 进而从抗应激和抗氧化的角度来探讨壳聚糖对仔猪免疫功能的影响。试验3从一氧化 氮(NO)途径研究了壳聚糖对断奶仔猪免疫功能的影响及其分子机制。试验4从花生 四烯酸(AA)途径研究了壳聚糖对断奶仔猪免疫功能的影响及其分子机制。试验5 和6利用体外法，进一步研究不同浓度壳聚糖培养液对断奶仔猪外周血单个核细胞 试验结果如下： 1．日粮中添加壳聚糖可显著提高断奶仔猪血清中免疫球蛋白G(IgG)的浓度和 特异性卵清白蛋白抗体(OVA．IgG)的含量(尸o．05)。随着壳聚糖的添加水平增加， 仔猪回肠和空肠黏膜表面分泌型免疫球蛋白A(slgA)的浓度呈现显著的一次或二次 明日粮中添加壳聚糖可显著地影响断奶仔猪体液免疫和细胞免疫功能。 2．壳聚糖可显著降低仔猪血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(COR) 的浓度，并呈现显著的一次或二次剂量依赖关系(PO．05)。随着壳聚糖添加量的增 可能通过缓减仔猪断奶应激、提高仔猪抗氧化能力，进而促进断奶仔猪的免疫功能。 3．壳聚糖可显著提高断奶仔猪血清中NO的浓度和诱导型一氧化氮合酶(iNOS) 的活力，也可显著提高小肠中iNOS mRNA的相对表达量，并呈现～次或二次剂量依 赖关系(尸0．05)。这表明壳聚糖可能通过提高iNOSmRNA的卡目对表达量和酶活力 来提高NO的浓度进而发挥其对机体的免疫调节功能。壳聚糖的添加水甲为500～1000 mg／kg时，血清NO浓度、iNOS的活力及小肠中iNOS mRNA的相对表达量较高；当日 粮中壳聚糖添加量提高为2000 mg／kg时，上述指标的值均呈不同程度的降低，这表明 壳聚糖对其影响呈现剂量依赖效应。 4．日粮添加壳聚糖显著提高了断奶仔猪血清中AA、前列腺素E2(PGE2)和自 疫调节功能。随着日粮中壳聚糖添加水平的升高，上述各指标的值呈现显著的二次战 线增加效应，其中以添加量为500～1000mg依g时效果较好，但添)3nN2000 mevkg时其 促进效果有降低趋势，这表明壳聚糖对其影响存在剂量依赖关系。 5．在培养基中添加壳聚糖可以显著提高断奶仔猪PBMCs中NO的浓度、iNOS的 由于iNOS活性的升高所导致，本试验在培养基中添加了iNOS的特异性抑制剂1400w， 中NO浓度、iNOS活力及其mRNA相对表达量具有双向调节功能。 和5．LOXmRNA的相对表达量与壳聚糖添加量之间也呈现显著的二次剂量增加效应 (尸0．05)。另外，当壳聚糖的添加量为80或160 gg／mL时上述所有指标的值均较高， 然而壳聚糖的添加量增加到320 gg／mL时上述各指标的值有不同程度的降低。结果提 示，壳聚糖能够调节断奶仔猪PBMCs中AA的代谢，且这种作用与壳聚糖的添加量存 在剂量依赖关系，这可能是其影响断奶仔猪免疫功能的机制之一。 本试验结果表明，壳聚糖可以通过缓减应激和提高抗氧化功能、并从NO和AA途 径调节断奶仔猪的免疫功能。综合以上试验结果初步推测，壳聚糖在断奶仔猪日粮中 适宜添加水平为500～1000m非g。 关键词：壳聚糖；断奶仔猪；免疫功能；抗氧化