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目 录
中文摘要………………………………………………………………………………………………I
英文摘要………………………………………………………………………………………………III
1前言…………………………………………………………………………………………………………………………………．1
1．1流行病学…………………………………………………………。………………………………．．1
1．2临床症状……………………………………………………………………………………………l
1．3 oPA的病理解剖!学变化…………………………………………………………………………l
1．3．1非典型OPA病例解剖学变化………………………………………………………………．1
1．3．2典型oPA病例解剖学变化………………………………………………………………．2
1．4JSRV致病原的鉴定………………………………………………………………………………．．2
1．5JSRV基冈组………………………………………………………………………………………。2
1．6JSRV的复制………………………………………………………………………………………………………………………3
1．7内源性JSIW……………………………………………………………………………………………………………………．．4
1．8JSRV的嗜组织性…………………………………………………………………………………．．5
1．9致瘤机理……………………………………………………………………………………………．．5
1．10JSRV检测方法的研究进展………………………………………………………………………5
1．11研究的目的与意义………………………………………………………………………………．．6
2材料与方法…………………………………………………………………………………………7
2．1材料………………j…………………………………………………………………………………………………………………7
2．1．1病毒、微生物材料及待检样品来源………………………………………………………7
2．1．2菌株和载体…………………………………………………………………………………7
2．1．3主要试剂……………………………………………………………………………………7
2．1．4主要试剂配制………………………………………………………………………………8
2．1．5仪器设备…………………………………………………………………………………．．9
2．2试验方法…………………………………………………………………………………………一10
2．2．1病料组织DNA的提取…………………………………………………………………。lO
2．2．2引物设计…………………………………………………………………………………10
2．2．3CA基冈的克隆……………………………………………………………………………………………．10
2．2．4重组表达质粒的构建．．．…………………………………………………………………．12
2．2．6表达条件的优化…………………………………………………………………………．14
2．2．7重组蛋白6CA66028a1的人鼙表达与纯化……………………………………………．．15
2．2．8重组蚩白6CA66028al的westemblot印迹……………………………………………15
2．2．9动物的免疫………………………………………………………………………………．15
2．2．10多抗的纯化……………………………………………………………………………．．16
2．2．11多抗的westemblot印迹………………………………………………………………．．16
2．2．12抗原、封口j液、一抗、二二抗间交义反应的测定………………………………………17
2．2．13最佳抗原及抗体’I：作浓度的确定………………………………………………………17
2．2．1 7
4间接竞争ELISA测定的基本实验步骤……………
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