EBVLMP1促CNE2细胞迁移的作用机制.pdf

维普资讯 中南大学学报 (医学版) 470 JCentSouthUniv(MedSci) EBV-LMP1促 CNE2细胞迁移 的作用机制 张志伟 ，贺智敏 ，周 敏 ，丁 渭 ，余艳辉 ，陈主初 (中南大学湘雅医学院肿瘤研 究所 ，长沙 410078) [摘要] 目的：探讨 EBV—LMP1对鼻咽癌细胞 CNE2迁移表 型 的影响及作 用机制。方法：用 — LNSX。RV．LMP1和 RV—LMP1 。逆转录病毒分别感染 CNE2细胞 ，G418筛选后 ，观察和检测转基 因细胞 的形态学特 点，在基质 中的运动迁移 能力 以及 E一钙黏蛋 白(E—Cadherin)表达 的变化 ；用pLNSX，pLNSX— LMP1和 pLNSX—LMP1 。质粒分别与 E—Cadherin报 告基 因共转 染 293细胞 ，检测 LMP1对 E—Cadherin启 动子 活性的影响。结果 ：与 CNE2和 CNE2一LNSX细胞相 比，CNE2一LMP1在培养过程 中由扁平、鹅 卵状上 皮细胞形 态逐渐演 变为细胞 间接触 消失的长梭 状 纤维细胞形 态 ，相 对迁移 明显增 大 (n=3，P0、05)， 且 E—Cadherin表达明显下调或缺失；随着共转染野生型 LMP1(pLNSX—LMP1)剂量 的增加 (O．2，0、6，1．O g)，对 E—Cadherin启动子 转录活化 的抑制率增加 ，呈明显浓度依赖性 ；LMP1 不 改变 CNE2细胞 形态 学及迁移表 型，对 E—Cadherin启动子的转录活性及 蛋 白表达 亦无 明显影响。结论 ：抑制 E—Cadherin启动 子 活化 可能是 EBV—LMP1下调 E—Cadherin蛋 白表达 、促 CNE2细胞 迁移的机 制之 一，位于LMP1羧基端的 TRADD可能是其促 迁移 的主要 活性部位 。 [关键词] EB病毒 ； 潜伏性膜蛋 白； 细胞转化 ； E一钙黏蛋 白； 迁移 [中图分类号] R73O．2 [文献标识码 ] A [文章编号] 1672—7347(2006)04—0470—05 M echanism ofmigrationin CNE2cellspromotedbyEBV-LMP1 ZHANG Zhi-wei，HE Zhi-min ，ZHOU Min，DING Wei，YU Yan-hui，CHEN Zhu-chu (CancerResearchInstitute，CentralSouthUniversity，Changsha410078，China) Abstract： Objective Toinvestigatethemechanismofmigrationphenotypechangeinducedby EBV-LMP1innasopharyngealcarcinoma (NPC)celllineCNE2．Methods RetrovirusesRV- - SX ，RV．LMP1，andRV．LMP1 ∞ prepraedpreviouslywereusedtoinfectCNE2 cells ． Afterse]ec． tionwithG418，themorphology，theabilityofmotion andmirgationin extracellularmatrix，expres- sion ofLMP1andE-Cadherin in transgeniccellswereobservedordetected．Meanwhile，pEcad-luc wasres