长苞凹舌兰取物对运动训练大鼠机体影响的组织表达谱研究.pdfVIP

长苞凹舌兰提取物对运动训练大鼠机体影响的组织表达谱研究 马新庭 麓要在运动医学看丹究领域，运动疲劳酶发生与转归机理、消除运动疲劳提 高机体运动能力的新方法筛选、运动能力的遗传学研究、人类是否存在运动疲劳 相关纂因群等问题是强前国际上潦多专家、学者高度关注和最令人振奋的课题。 目前，中医药消除运动性疲劳的研究，多以中医理论的整体观念磁发，以脏腑学 说为巾心，并结合现代医学基础理论，运用较先进的科研手段和方法，使中医的 辩证论从宏蕊走向微观，中药的磺究跃主观判定囱客硗指标发展。我们应f}；l{缀织 芯片技术研究长苞凹舌兰提取物对运动训练大鼠机体的影响，为探讨运动疲劳产 生的规律；}珏机制，选择科学豹中蕊加速疲劳消除，提高运动能力提供裂学的实验 依据。 组织芯片具有体积小、信息含量高、并可根据不同的需要进行缀合和设计的 特点。它适用于免疫维化操作、原位PCR、原位杂交，并能大大提高实验效率， 而且可根据需要灵活设计，所得结果均一可靠、可比性强，具有高通量、并行性、 多样本、省对快速、筠使经济、蠲途广泛、结果可靠、便予设计实验对照等优点。 本实验首次将组织芯片技术引入运动人体科学研究领域，建立了运动大鼠组织芯 片，为组织芯片技术在运动人体科学研究领域的应用进行了探究性研究。 材料与方法： 中心提供，饲精采用该实验动物中心提供的国家标准靖齿类动物于燥饲料。实验 大鼠均为3月龄，其平均体重为255_+209，共48只。常规分笼饲养，自由饮水进 食，常规光照，，动物室溢度为18℃--23℃，湿度40～60％。鸯R药组每丑以长苞 凹舌兰提取物灌胃lml，其余则灌臀安慰剂蒸馏水。按实验要求将大鼠分为安静对 照组，有氧训练组，大强度疲劳组，服药对照组，服药有氧组，服药太强度鳃各8 只。 长苞凹舌兰药材购自陕西中药材市场，经陕两师范大学生命科学院植物教研 室任毅教授鉴定为兰科辕物长苞阴舌兰豹G．conopsedR．Br．的决茎。长苞凹舌兰药 材3009加入95％乙醇放入超声发生仪提取3次，过滤，合并滤液，回收乙醇，入 旋转蒸发仪蒸发呈糊状，至不再有滔精蒸斑，以蒸馏水溶出备用，滚滚浓度1％。 运动方案： (1)对照缎及加药对照组：正常笼内生活状态，自由饮食，不运动。 (2)有氧训练缀及加药有氧缝：每周5d，共8week。适应性谢练3d后开始 d训练15min， 增加运动时间和运动速度：第1d，训练10min，速度10m／min，第2 速度10m／min，第3d训练时间为15min，速度13m／min，如此，运动时间、速度 隔日交替增加：先增时间，递增时间5min，递增速度3m／min。运动速度增至 20m／min，运动持续时间增至60min后持续该强度和运动量。 (3)疲劳训练组及加药疲劳组：每周6d，共8week。适应性训练3d后开始增 加运动时间和运动速度：第1d速度10m／min，时间10min第2d速度10m／min，时 间15rain，第3d速度13m／min，时间15min。运动强度增加同上，当运动速度增 至20m／min，增加跑台坡度为5度，最终运动速度增至35m／min，运动持续时间增 至60min。 大鼠运动训练8week于末次训练后次日上午摘取眼球取血。待检血红蛋白、 血睾酮和皮质醇的血样加入0．1％肝素抗凝，待检其他指标者离心取血清。 灌注固定取材，摘取各组织、固定，制作组织芯片。 c．fos指标积分光密度的变化。 结果： 1．不同运动训练强度可抑制大鼠体重的增长率，尤其疲劳训练表现明显；中药 长苞凹舌兰提取物对体重的增长没有明显影响；有氧和疲劳训练对提高心脏重量、 心系数有着明显的意义，中药长苞凹舌兰提取物对心系数无显著影响。 2．中药长苞凹舌兰提取物在一定程度上可以降低Bun浓度、升高血红蛋白、血 糖和血睾酮浓度，延缓疲劳的发生；中药长苞凹舌兰提取物可在一定程度上改善 运动性低T症，提高大鼠运动能力；同时它升高LDH、降低CK在血液中的浓度。 3．成功制备组织芯片。得到包含144组织点6套组织蜡块，蜡块完整，肉眼可 见组织点排列整齐，无缺损现象。组织点直径lmm，相距lmm，切片厚度3／tm。 芯片各点阵排列整齐，薄厚均匀，HE染色层次分明，对比明显，缺片率在0～2％ 之间，组织折叠现象少见；经形态学观察显示与大组织切片在形态学上无差异； 与预设计符