‘砀山酥梨’褐皮芽变中两个ERF基因的克隆与表达分析.pdfVIP

热带亚热带植物学报　2015 ，23(4) ：379 ~ 385 Journal of Tropical and Subtropical Botany ‘ ’ 砀 山酥梨 褐皮芽变中两个ERF基 因的克隆与表达 分析 王孟东, 杨金宇, 黄海娜, 朱立武, 衡伟* (安徽农业大学园艺学院 , 合肥 230036) 摘要： 为了解梨(Pyrus bretschneideri) 中 ERF 基 因的功能 ，采用 3′ RACE 和 PCR 技术从 ‘砀 山酥梨 ’中克隆了两个 ERF 基 因， 并对其表达进行 了分析 。克隆的两个 ERF 基 因都具有典型的 AP2/ERF 结构域 ，属于 ERF 基 因家族 ，分别命名为 PbERF2 和 PbERF4 PbERF4 ，GenBank 登录号分别为 KJ623716 和 KJ623718。系统进化分析表明，PbERF2 与枇杷 ERF 1， 与黄瓜 ERF 1 的亲缘关系较近。表达分析表 明， 和 在叶片中几乎不表达 ，果皮 中的表达量高于果 肉；‘锈酥 ’果皮 3 个发育 PbERF2 PbERF4 时期 的 PbERF2 和 PbERF4 表达量均显著高于 ‘砀山酥梨 ’，且均呈现先上升后下降的趋势 。这为深入研究梨 ERF 基 因家族 的 作用机理提供 了理论依据 。 关键词： 梨 ； 基 因；实时荧光定量反转录 PCR ERF doi: 10.11926/j .issn.1005–3395.2015.04.003 Cloning and Expression Analysis of Two ERF Genes in Pericarp of ‘ ’ Russet Mutant of Dangshansuli Pear * WANG Meng-dong, YANG Jin-yu, HUANG Hai-na, ZHU Li-wu, HENG Wei (School of Horticulture, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China) Abstract: The aim was to understand the function of ethylene responsive factor (ERF) in Pyrus bretschneideri. Two ERF genes were cloned from pericarp of ‘Dangshansuli’ and its russet mutant ‘Xiusu’ by using 3′ RACE and PCR monthods. Both of genes had typical conserved domain of AP2/ERF, named as PbERF2 and PbERF4, with GenBank accession No. of KJ623716 and KJ623718, respectively. The phylogenetic tree showed that PbERF2 had closed correlation with ERF1 in loquat (Eriobotrya japonica) and PbERF4 was closed to ERF1 in cucumber (Cucumis sativus). Semi-quantitative RT-PCR indicated that expressions of PbERF2 and PbERF4 in pericarps were higher than those in sarcocarps, and both hardly expressed in leaves. Real-time RT-PCR