离子液体双水相萃取分离青霉素.pdfVIP

第50 卷 第8 期 2005 年4 月 论 文 离子液体双水相萃取分离青霉素 * * 刘庆芬 胡雪生 王玉红 杨 屏 夏寒松 余 江 刘会洲 中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室, 生化工程国家重点实验室, 北京 100080; 中国科学院研究生院, 北京 100039; 华北制药集团, 石家庄 050015. * 联系人, E-mail: hzliu@, jyu0017@ 摘要 建立了由亲水性离子液体1-丁基-3- 甲基咪唑四氟硼酸[Bmim]BF 和NaH PO 形成的双水相体系 4 2 4 萃取青霉素G 的新方法. 考察了NaH PO 浓度 青霉素浓度以及离子液体用量对双水相形成和萃取率 2 4 的影响. 结果表明, 离子液体双水相体系的pH 值在4~5 范围内, 在该条件下萃取过程不发生乳化现象. 关键词 离子液体 磷酸盐 双水相 青霉素G 萃取 青霉素 G 是目前世界上产量最大且应用最为广 成上相富集离子液体和下相富集磷酸钾的双水相体 泛的抗生素. 传统的分离青霉素的方法为溶媒萃取 法. 以分子溶剂为萃取剂从滤液中分离纯化青霉素 系 ATPS . 该双水相体系是由一种有机盐 亲水性离 [1] 子液体 和一种无机盐 磷酸盐 形成, 不同于传统意 已得到广泛的研究与应用 . 工业上一般采用醋酸丁 [2] 酯为萃取剂, 在pH 值 1.8~2.2 时进行萃取 . 此生产 义的双水相体系. 工艺存在很多问题: 青霉素在酸性水溶液中不稳定, 本文以亲水性离子液体[Bmim]BF 和 NaH PO 4 2 4 容易发生降解而影响青霉素的收率和质量; 滤液中 2H O 水溶液形成的双水相体系为研究对象, 考察了 的蛋白质在强酸性条件下变性而导致萃取过程严重 2 [3] 影响双水相形成的因素以及青霉素 G 的萃取特性. 乳化 , 影响两相分离; 有机溶剂的挥发造成环境污 染, 且存在潜在的爆炸危险. 特别考察了NaH PO 浓度 青霉素浓度以及[Bmim]- 2 4 双水相分配技术是近年来发展起来的提取和纯 BF4 的浓度对双水相的形成和萃取率的影响, 同时考 化生物活性物质的新型分离方法之一. 一般而言, 双 察了萃取体系pH 值变化以及乳化现象. 水相系统 ATPS 是指把两种聚合物或一种聚合物与 1 材料与方法 一种盐的水溶液混合在一起, 由于聚合物与聚合物 材料. 青霉素G 钾盐, 含量99.5%, 由华北 之间或聚合物与盐之间的不相溶性而形成互不相溶 制药集团倍达有限公司提供; 青霉素滤液, 含量 的两相. 由于双水相技术操作条件温和, 可连续操作, 30000 u/mL, 由华北制药集团倍达有限公司提供; 离 [4] 易于放大, 愈来愈受到人们的关注. Guan 等 用聚乙 子液体 [Bmim]BF 按文献[7,9,10] 合成并纯化; 4 二醇 PEG 2000/ NH SO 双水相技术提取青霉素发 4 2 4 NaH PO 2H O, 分析纯, 含量 99%, 由北京市红星 2 4 2 酵液的结果表明, 青霉素 G 的分配系数可达 58.39, 化工厂提供. 但如何有效回收双水相中的聚合物的难题没有得到 青霉素含量测定方法. 青霉素G 钾水溶液 解决. 浓度采用 WZZ-2A 型自动旋光仪 上海精密科学仪器 [5,6] 近年来, 一种新型绿色溶剂 离子液体 的 有限公司 测定; 双水相中青霉素含量在Waters Tm 出现引起各国学者的广泛关注. 离子液体是指在由 486 高压液相色谱仪上测定, 柱型C18 4.6 mm ×200 离子组成的室温时呈液态的液体, 一般由有机阳离 mm, 流动相为醋酸缓冲液/ 磷酸缓冲液/ 乙腈 子和无机阴离子组成. 改变阴阳离子组成, 可以合成 3/25/125 体积 , 流速1.1 mL/min. iii 萃取方法. 准确称取一定量青霉素 G 钾盐 不同性质的离子液体, 被称为“设计者溶剂”. 离子液 用蒸馏水定容到50 mL 容量瓶中, 用旋光法测定青霉 体几乎没有蒸气压, 不挥发. 离子液体分为疏水性和 素效价. 取上述溶液 5 mL 置于烧杯中, 再称取一定 亲水性两种类型, 研究表明, 疏水性离子液体萃取红 量离子液体 [Bmim]BF 和一定量的NaH PO 2H O 4 2 4 2 [7] 霉素得到很好的效果 . 加入烧杯中; 室温下电磁搅拌 5 min, 静置分层, 准 [8] 确量取两相体积, 记录 p