荧光编码微球—流式细胞和生化分析技术及其最新发展.pdfVIP

维普资讯 技术进展与市场动态 生命科学仪器 2003第 1卷 ／第 1期 31—36 TechnologicalAdvancesAndMarketDevelopments 荧光编码微球一流式细胞和 生化分析技术及其最新发展 拳 牟 颖 金钦汉 (7．吉林大学分子酶学工程教育部重 点实验室；2．吉林大学化学学院分析科学研 究所 3．吉林大学吉林省光谱仪器工程技术研究中心．吉林省长春市 ．130023) 摘要 ：简述了流式细胞术的发展历史和工作原理。对该技术与荧光编码微球技术相结合而发展起来的高通 量细胞和生化分析技术及其最新发展作 了评述。流式细胞术是一种对流动液体中排成单列的细胞逐个进行检测 的技术．通过检测得到相应细胞的光散射和荧光信号 ．进而测定细胞的大小．形状、DNA、RNA．表面受体 ．酶 活性、膜通透性和钙流量等 ．在癌症和爱滋病研究、新药开发、干细胞和基因治疗 ．遗传学、家畜性别选择 、 农作物新品种开发等方面都有广泛应用。采用顺序进样技术 ，则可不必加压而实现少量样品的自动分析和作亚 秒水平分子相互作用的动力学测量。将该技术与近年发展起来的荧光染料编码微球技术相结合 ．则成为一种可 以与生物芯片技术相媲美的多组分同时分析技术。采用微流控芯片技术和发光半导体量子点编码微球技术，进 一 步改善了方法的适用性 ．某些主要性能甚至超过了生物芯片技术 ，有望从研究实验室逐步进入临床实验室， 最终进入病房和寻常百姓家 ，成为防病、诊断和监护病人的重要手段。 关键词 ：流式细胞术 荧光编码微球 细胞和生化分析 发光量子点 微流控芯片 流式细胞 术 (flOW cytometry， (BD 公司)生产的流式细胞仪系列 交法也 只能检测有限数 目的组分 ，微 FCM)是利用流式细胞仪对细胞或亚 产品就都冠 以FACS字头 I。 芯 片阵列 虽可 作非常大 量的基 因分 细胞结构进行快速测量的分析和分选 传统的FCM所能获得的参数主要 析 ，但难 以测定大量 (如 lO0左右 ) 技术，其特点是测量速度快 ，最快可 限于细胞、细菌或微粒的大小 、形状 的细胞和化学因子，更难以定量测定 在 1秒钟内计测数万个细胞 ；可对同 及其 比率，难以作生物医学上有重要 蛋白质，而这对于蛋白质组学的研究 一 个细胞做有关物理、化学特性的多 意 义的复杂样 品中多组分 的同时检 来说是十分重要的1一1。随着生物医学 参 数测量 ，并具有 明显的统计学意 测，更难 以对基因和蛋 白质做全基因 研究变得越来越复杂 ，越来越要求同 义。流式细胞术是一种综合性很高的 组分析 ，而这是进行未知基因功能分 时定量测定多种组分，以便作出更确切 细胞分析和分选技术，它综合 了流体 析 以鉴定疾病相关基因、药物筛选和 的诊断。因此理想的细胞和生化分析 力学 、细胞化学 、激光技术、计算 临床诊断所必须的。尽管这方面已有 方法，应是能作同时多组分测量并能测 机技术、图象技术等众多领域的知识 酶联免疫吸附分析 (ELISA)、核糖 定天然产物的方法。在这方面，新近发 和成果。由于FCM主要利用染色细胞 核酸酶保护分析 (RPA)、聚合酶链 展起来的以荧光编码微球为基础的流 的荧光和散射光进行检测，因此，也 式反应 (PCR)、原位杂交法及微阵 式细胞和生化分析技术将成为一种新 有人把 它称为荧光激 活细胞分 选器 列芯片 (生物芯片)等许 多方法可资 的重要的技术平台1】。由于这