用RTPCR法检测食品中诺沃克样病毒.pdfVIP

食品与发酵工业 #$%#!’(%)$)*%+%#,-)’*- ! 用!#$%!法检测食品中诺沃克样病毒! 陈广全 饶 红 张惠媛 付溥博 冯 骞 （北京出入境检验检疫局，北京， ） !#$ 摘 要 使用%’()%法对贝类样品中的诺沃克样病毒进行了检测。对食品中不同的病毒富集 方法进行了研究，评价了 和 去除 抑制剂的效果，筛选出最佳的病毒富集方 )*)+ -./012 %’()% , 法：即 次 （终浓度 ， ／ ）沉降病毒，并使用 除去 # (34$ !#5 (34$6,71+89:)+ )*)+ %’ , ()%抑制剂。此富集方法的回收率为!,6;5。另外，对不同的%9提取方法的灵敏度进行了比 较，最终确认硅胶膜法为简便、快速、有效的 提取方法。并且，使用了 反转录酶进 %9 =/.@A.BC ? ? 行反转录，提高了检测的灵敏度。选用了 和 混合引物进行食品中 的检测，这一引物 #DE #E 98F@ 组合可同时检测 型和 型 ，扩增出 个 的特异性片段。通过以上条件的优化，建立 ! 98F@ ! ,!EG ? 了通过 检测贝类中 的有效方法。该方法的 最低检出限为 , %’()% 98F@ 98F@ !6H! %I ／ 。对 件贝类样品进行了 的检测，其中 份毛蚶中被检出 。 ()%;!6; ,# 98F@ # 98F@ J 关键词 %’()%法，检测，贝类，诺沃克样病毒 ［］ O 诺沃克病毒（ ）是一组与人 势发出警示 。 91.P:+QFB.@ 类急性胃肠炎有关的、无胞膜、表面缺乏杯状凹 由于诺沃克样病毒不能在体外繁殖，也无 陷，只有小凹痕的小圆状结构病毒，如 ， 动物模型，不能用组织培养法或动物实验进行 9F ［］ E =21P 712C:B2等，直径为#$#,;27，属杯状 分离检测 ，同时其感染剂量非常低，估计为