电刺激dPAG对大鼠脑缺血的保护作用以及乌拉坦背景作用讨论.pdf

摘要 摘要 目的 脑血管疾病以其高发生率、高死亡率和高致残率为特征，对人类的生命和 健康有极大危害。电刺激治疗作为一种新兴的内源性保护治疗，逐渐被人们认 识。本文选择了对脑缺血具有预防保护作用的中脑导水管周围灰质背侧(dorsal periaqueductalgrey，dPAG)神经核团，观察缺血后电刺激dPAG对神经损伤和 自主神经功能障碍的影响和作用。由于恢复再灌注是临床脑缺血治疗的必要措 施，所以我们同时结合缺血后再灌注的研究，比较两者各自的优势和特点，为 临床实验和治疗提供参考。更进一步，还研究了实验中常用的麻醉剂乌拉坦对 钠、钾离子通道的影响和对神经元自发放电的作用，并结合缺血后神经元的损 伤机制进行了讨论。一方面深入了解其麻醉机制，另一方面了解乌拉坦对动物 实验尤其是对脑缺血实验的潜在影响，得出其作为动物实验的常用麻醉药的优、 缺点和应该注意的地方。 方法 cerebral 加电刺激dPAGlh组。用大脑中动脉阻塞方法(Middlearteryocclusion, nerve 率(Heartrate，HR)和肾交感神经放电(Renal activity,RSNA)。 sympathetic 实验结束后，取出大脑作氯化三苯四氮唑(2，3，5．triphenyltetrazoliumchloride， rate 间隔计算心率变异性(heart 的能量和在心率频率上的能量。这样，以BP、HR、HRV和RSNA作为判断脑 缺血后自主神经功能障碍的指标，TTC染色作为判断脑梗死体积的指标，比较 电刺激dPAG和再灌注的作用。 第二部分：出生后15—23天的Wistar大鼠，制作海马脑片。用膜片钳中的 电压钳技术研究乌拉坦对钠离子通道电流(氐。)、延迟外向整流钾通道电流 rectifier (Delay potassium outward current，／A)的作用；用膜片钳中的电流钳技术研究乌拉坦对 potassium 摘要 单个动作电位、连续动作电位和自发放电的作用。乌拉坦对离子通道的作用， 使用了电流幅值、离子通道的激活、失活和失活后恢复的动力学指标；对单个 动作电位的作用，使用了电位幅值、时程；对连续动作电位的作用，分析了放 电频率；对自发放电的作用，研究了乌拉坦对其放电频率和放电模式的影响， 并应用了非线性分析手段，比较了乌拉坦作用前后自发放电的峰峰间隔序列的 复杂度和分形特征。 所有实验数据经Student—t检验等统计学处理，PO．05表示存在显著性差异。 结果 1)缺血2h加电刺激dPAGlh组跟缺血5h组比较，脑梗死体积明显降低， 使缺血后BP降低的趋势缓和，增强脑缺血后的自主神经总活性和迷走神经活 性。 2)缺血2h再灌注3h组跟缺血5h组比较，脑梗死体积增大，但可以使 HR恢复到接近基础值水平，使缺血后降低的自主神经活性升高，减轻脑缺血 后的自主神经功能障碍。 3)乌拉坦可以以浓度依赖的方式抑制钠通道电流和单个动作电位。在实 验浓度时，乌拉坦降低钠电流的幅值，使钠通道的激活曲线向去极化方向移动， 失活后恢复的时间延长，但对失活动力学没有影响。lOmM的乌拉坦还可以降 低单个动作电位的幅值。 4)实验浓度的乌拉坦对五和厶的幅值和通道动力学都没有影响。但在超 的乌拉坦可以抑制连续动作电位，使放电频率降低。 5)10mM的乌拉坦可以抑制海马CAl锥体神经元的自发放电，使其放电 频率降低。另外，对自发放电峰峰间隔序列进行了非线性动力学分析，其中样 品熵(Sample fluctuation 序列的复杂度，去趋势波动法(Detrended 子(Fanofactor)计算方法的计算结果指出乌拉坦可以降低自发放电峰峰间隔序 列的长时程相关性(Long—rangetemporal 影响其分形特征。 结论