树突状细胞在胃癌组织中的功能变化及其抗癌作用的实验的研究.pdf

中文摘要 色素瘤等的临床或临床前期研究中，取得了一定疗效。 目前，胃癌及区域淋巴结中浸润性DC功能状态、胃癌细胞对DC表 型和功能影响及胃癌细胞抗原致敏DC对T淋巴细胞的影响及其在体内、 体外活化特异性CTL杀伤胃癌细胞的作用已成为了研究热点。据此，本 研究以胃癌及区域淋巴结中浸润性DC、人外周血来源的DC、胃癌细胞 抗原致敏DC、胃癌细胞和荷瘤鼠为研究对象，应用细胞培养、动物实验、 流式细胞术、酶联免疫、MTT、病理、电镜形态学观察等方法，对胃癌 及区域淋巴结中浸润性DC、人外周血来源的DC、胃癌细胞抗原致敏DC ^、 的功能变化及致敏DC活化的特异性CTL在体内、外杀伤胃癌细胞的作 q 用进行研究，旨在探讨胃癌及区域淋巴结中DC功能变化与胃癌发生、发 展的关系以及DC在胃癌免疫治疗中的作用和机制，为胃癌患者免疫功能 状态评价及预后判断提供客观免疫学指标，并为开展胃癌的免疫生物学治 疗提供理论和动物实验基础。 研究内容和结果如下： 第一部分 胃癌及区域淋巴结中浸润性树突状细胞功能变化及其临床意 义 目的：研究胃癌及区域淋巴结中浸润性树突状细胞(tumorinfiltrating dendritic 表型变化，探讨胃癌及区域淋巴结中TIDC功能状态与胃癌发生、发展及 其与胃癌临床生物学行为的关系。 方法：提取胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织、有转移和无转移区域 淋巴结中的TIDC，并经细胞因子体外刺激扩增，流式细胞术检测TIDC 的CD83、CD80、CD86表型变化，探讨其与胃癌发生、发展及与胃癌 临床生物学行为的关系。 J l 结果 ’一。 ■ l 胃癌组织及区域淋巴结、正常胃组织中TIDC经培养扩增后，在倒置 显微镜下和瑞氏染色后形态观察可见典型的树突状改变，细胞呈不规则的 ≮ 圆形，周边可见树突状突起。 2 胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织中TIDC的CD83表达分别为7．24 中文摘要 达分别显著低于癌旁组织及正常胃组织，差异有显著性(氏O．01)。 3 (氏O．01)。 4 瘤大小、浸润深度无关(PO．05)。而三者在低分化腺癌组、有转移淋巴结 组和III+Ⅳ期组的表达明显低于高中分化组、无转移淋巴结组、I+II期 组，差异有显著性俨O．01或O．05)。 结论：胃癌组织和有转移的区域淋巴结中成熟TIDC数量减少、共刺 激分子表达下降，DC的抗原提呈功能低下，机体对胃癌细胞的识别能力 减退，从而产生胃癌免疫逃逸，与胃癌的发生、发展有关。胃癌组织中 TIDC的功能状态可能受到胃癌细胞本身特性的影响。为阐明胃癌免疫逃 逸机制、开展胃癌的免疫生物学治疗提供了理论和临床基础。 第二部分人外周血树突状细胞的扩增及人胃癌细胞培养上清液对其表 型的影响 目的：研究不同人胃癌细胞培养上清液对人外周血成熟DC表型的影 响，探索DC功能下降的机制，为胃癌的免疫生物治疗提供实验依据。 方法：自健康人外周血诱导培养获取大量具有典型形态学特征的DC， CD86、甩A．DR表型。并获取不同胃癌细胞及正常胃上皮细胞的培养上 清液，酶联免疫法检测上清液中的血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介 素．10(IL．10)、转化生长因子．B1(TGF—B1)蛋白含量。DC培养液中加入 胃癌细胞培养上清液，流式细胞术检测DC表型的变化。 结果 1 DC的形态学观察：倒置显微镜下观察DC细胞形态不规则，表面有 大量的毛刺状突起。扫描电镜观察DC表面粗糙，胞体向四周伸出大量树 枝状或裙褶状不规