血红素加氧酶-1在大鼠肢体缺血再灌注性肺损伤及预处理中作用.pdf

温州医学院硕士论文 血红素加氧酶一1在大鼠肢体缺血再灌注 性肺损伤及预处理中的作用 硕士研究生： 周威 导 师：李军教授 中文摘要 目的： 观察血红素加氧酶-I(heme 鼠肢体缺血再灌注性肺损伤的变化，阐明缺血预处理肺保护作用的相关机制；进 一步阐述尿蛋白酶抑制剂(urinarytrypsin 源性保护系统的相互关联，为该药的临床应用提供实验基础和理论依据。 方法：雄性sD大鼠64只，随机分为四组：假手术组(s)，缺血再灌注组(I／R) 缺血预处理组(IPR)及尿蛋白酶抑制剂(乌司他丁)预处理组(UTI)。假手术 组(S，n=16)：仅钝性分离双侧腹股沟三角处股动脉，不予夹闭，作为时间对照， 术中使用公斤体重1／3-I／2的水合氯醛维持麻醉至无体动反应。缺血再灌注组 (I／R，n=16)：股动脉夹闭前30分钟颈内静脉给予生理盐水Iml作为溶剂对照。 制作双下肢缺血2小时、再灌注2小时(n=8和4小时(n=8)模型。缺血预处理组 (IPR，n=16)：股动脉夹闭前30分钟实施缺血5分钟、再灌注5分钟，循环3 次后余同I／R组。乌司他丁处理组(UTI)：股动脉夹闭前30分钟，颈内静脉给 予公斤体重50000U的乌司他丁，再灌注前lO分钟再给予公斤体重50000U的乌 司他丁，余同I／R组。分别于再灌注2小时和4小时末取大鼠左肺组织制备石蜡 标本，行组织学检查及用免疫组化法测定Ho_l的半定量和定位表达(n-8)，新 鲜肺组织测量湿／干比，免疫印迹法测右肺组织H旷1蛋白表达水平(n：8)。 结果： l、形态学变化：I／R组可见肺组织水肿、毛细血管扩张充血、血管周围间隙 增大、肺问质有大量的炎症细胞浸润，部分肺泡腔可见出血，并伴局部肺不张。 IPR组及UTI组的肺组织损伤病理改变明显减轻，较S组无统计学差异。 4 温州医学院硕士论文 2、肺水肿：I／R组肺组织肺湿／干比明显增加，形态学也可见间质水肿表现， ／干比都较I／R组明显减少(尺O．05)，再灌注4小时更为明显(只O．05)，与S组 相比差异无统计学意义。 3、Ho_l表达的变化：免疫印迹：与S组相比，I／R组再灌注2、4小时可见 达到保护肺损伤的作用(P(O．01)，与再灌注2小时相比，再灌注4小时仍可见其 高表达状态(尺O．05)。免疫组化蛋白半定量表达结果与免疫印迹相符合，并可观 察到H0-l表达的位置主要在肺支气管上皮细胞、血管内皮细胞、炎症细胞，肺 泡上皮细胞也可见表达。 结论： 大鼠肢体缺血2小时再灌注2小时就可引起远隔肺损伤，其病理表现类 似急性肺损伤(ALI)。经典的缺血预处理的肺保护作用可能与上调并持续H0_l 的表达有关，乌司他丁预处理揭示了两种内源性保护系统间存在着相互作用的联 系，并从而共同发挥肺保护作用，其保护作用可以达到与经典缺血预处理相当的 结果。 关键词： 血红素加氧酶一l；缺血预处理；乌司他丁；缺血再灌注 5 温州医学院硕士论文 TheroleofH0—1in andulinasta廿n ischemic in remote in preconditioningattenuatinglunginjury ratsmodeloflowerlimbischmia reperfusion Wei Postgraduate：ZHOU Tutor：ProfLIJun To theroleofHO-linischemic