银杏内酯A防治阿尔茨海默病作用及机制和研究.pdf

中文摘要 disease，AD)是一种发生于老年或老年前期的中枢 阿尔茨海默病(Alzheimer’s 神经系统退行性病变疾病，以进行性的记忆认知障碍、人格改变为主要特征，其 典型的病理变化包括p．淀粉样蛋白(Ap)沉积、Tau蛋白异常过度磷酸化、皮层与 海马组织广泛神经元丢失。随着全球老龄化的进程，其发病率日益增加，给家庭 和社会带来了沉重的负担，AD已成为当今神经科学及老年医学备受关注的研究 课题，开发AD治疗药物、探讨分子作用机制迫在眉睫。 目的： 胞凋亡的保护作用。 通路的影响。 常磷酸化的影响。 方法： (1)以鼠成神经母细胞瘤细胞(N2a)为对象，M1vr法检测不同剂量的银杏 内酯A对N2a细胞的毒性以及对冈田酸(OA)诱导的N2a细胞死亡的保护作用： 吖啶橙／溴化乙锭(AO／EB)5叹染荧光显微镜法观察银杏内酯A对OA作用下的N2a 细胞的保护作用；AnnexinV-FITC／PI双染法流式细胞术检测银杏内酯A对OA 诱导的N2a细胞凋亡的影响。 (2)使用OA干预N2a细胞生长，诱导细胞Tau蛋白过度磷酸化，银杏内 含量，蛋白免疫印迹法(western 达。 AD小鼠行为学改变；ELISA和westernblot检Nd,鼠海马组织中Tau蛋白磷酸 化水平，HE染色法观察小鼠脑神经细胞病理形态变化。 结果： 银杏内酯A防治阿尔茨海默病作用及机制研究 阻止了OA诱导的细胞活力下降；与正常对照相比，OA模型组细胞凋亡及坏死 数量明显升高，不同浓度银杏内酯A作用后的细胞凋亡和坏死状况有所改善， 且银杏内酯A高剂量组(10～)细胞几乎恢复至正常状态，表明银杏内酯A对OA 诱导的细胞凋亡具有保护及改善作用。 (2)低剂量银杏内酯A(10’。7M)效果不明显，但随着银杏内酯A浓度的增加， Ser9位点的丝氨酸残基磷酸化也得到抑 Tau蛋白异常磷酸化显著改善，GSK．3p 制，同时P13K和Akt的Tyr508和Ser473位点被磷酸化。 (3)与模型组相比，银杏内酯A处理的拟ADd鼠Tau蛋白磷酸化水平有所 下降，神经元的数量显著增多，形态也比较完整，银杏内酯A可以对抗由AB诱导 引起的毒性作用。 结论： 神经细胞凋亡是AD发生过程中的一个重要机制，研究发现银杏内酯A对 OA诱导的N2a细胞凋亡具有一定程度的保护作用；NFTs是AD患者脑内典型 的病理特征之一，异常磷酸化Tau蛋白是其主要组成成分，实验结果显示银杏内 酯A能够剂量依赖性的改善Tau蛋白异常磷酸化，其机制可能是P13K．Akt信号 通路的激活；另外，拟AD小鼠实验结果表明银杏内酯A对A13造成的神经毒性 和Tau蛋白磷酸化有显著的抑制作用。 关键词：银杏内酯A，阿尔茨海默病，Tau过度磷酸化，P13K．Akt信号通路 ABSTRACT Alzheimer’s a diseaseofthecentralnervous disease(AD)isneurodegenerative inold or themainfeature old，with systemageearly includingcognitiveimpairment ofthe include changes memo巧andpersonalitychanges．Itstypicalpathological andextensive beta-amyloidprotein(A13)deposition,tauproteinhyperphosphorylation neuronslos