异拔葜皂甙元对胆碱能神经系统的保护作用及分子机制和研究.pdf

异拔葜皂甙元对胆碱能神经系统的保护作用及分子机制研究 摘要 老年性痴呆亦称阿尔兹海默病(A龇cim盯’sDise硒e，AD)，是一种以记忆减退、 认知障碍为特征的中枢神经退行性疾病。AD的主要病理特征为细胞外间隙一淀粉 样蛋白(AB)沉积所形成的老年斑(SP)、细胞内异常磷酸化的Tau蛋白聚集所形 成的神经纤维缠结(NFT)以及皮层、海马区神经元丢失。在中枢胆碱能神经系统 内则以基底前脑的Meynert基底核胆碱能系统变化最明显。神经生物化学研究显示， AD患者乙酰胆碱(ACh)的合成减少，胆碱乙酰转移酶(Cm盯)活性下降，与痴 呆的严重程度密切相关。脑源性营养因子(BDNF)及其受体的某种缺陷可引起的 胆碱能神经元形态、功能上的变化是造成学习记忆与认知功能衰退的主要原因之 一。目前世界各国积极寻找有效药物，但收效有限，但是中医药在防治神经退行性 疾病有其独特之处． 已有的研究表明知母的活性成分ZMS能改善老年动物的学习记忆功能，但是 其机制不明。本研究探讨ZMS及其异构体SMI对胆碱能神经细胞退行性的影响和 作用机制。 一整体动物实验： 选用胆碱能损害拟AD大鼠模型和自然衰老模型，运用Y迷宫观察行为学的变 化；放射配基结合分析、放射化学、免疫组化和ELISA方法研究AD模型鼠脑M1 药物SMI的作用。结果显示：SMI能明显改善模型大鼠学习指数和记忆指数；明显 上调模型大鼠M受体和／或M1受体密度；明显提升增龄引起下降的大鼠脑ChAT 功能：明显上调增龄引起下降的BDNF表达，但均未超过正常对照组。 二离体细胞实验 细胞下降的MTT值；提升AD细胞模型下降的M受体密度；保护ChAT阳性细胞 且都高于正常对照组；加用BDNF功能性抗体和化学性阻断剂K252a阻断 BDNF—m①通路后，可以抵消SMI保护AD细胞模型的功能，包括对M受体密度 和CILAT阳性细胞。 三结论 1．SMI对AB毒性损伤所致的学习记忆功能减退具有保护作用，提升模型组下降的 M受体密度和M1受体密度；SMI对增龄引起的学习记忆功能减退具有保护作 用，提高下降的M受体密度，改善ChAT活力，升高增龄引起的BDNF水平。 这都对AD的有效防治具有重要意义。 2．SMI能有效阻止AD毒性损伤所致的神经细胞毒作用。SMI对AD毒性作用所引 起的BDNF水平的下降，M受体密度的下降，ChAT阳性细胞数目减少和ChAT 阳性细胞轴突断裂缩短具有抑制作用。同时实验表明了BDNF确实参与了SMI 恢复AD毒性损伤所致的神经细胞的胆碱能功能。 3．SMI具有与目前II缶床使用的胆碱酯酶抑制剂不同的作用特点，提示SMI可能使 其在尽量减少毒副作用的前提下，达到更有效地防治AD的目的。 关键词：阿尔兹海默病，异拔葜皂甙元，p淀粉样肽，胆碱乙酰转移酶，M受体，脑 源性神经营养因子 on of StudiestheProtectionCentral Neuronal Cholinergic Systemby anditsMechanisms Smilagenin ABSTRACT a mental Alzheimer’s diseasecharacterized disease(AD)isdegenerative by retardation．Its featuresareextraeell『1darsenile the pathological plaque(SP)formedby ofthe the depositionp—amyloid(Ap)，neur