脑啡肽增强胶质细胞的神经营养作用与NO生成减少有关.pdfVIP

生理学报 , 1999 年 6 月 , 51 (3) , 327～332 　327 　 Acta Physiologica Sinica 脑啡肽增强胶质细胞的神经营养作用 与 NO 生成减少有关3 魏光伟 　杜莅娜 　朱粹青 　唐崇仁 　曹小定 　吴根诚 3 3 (上海医科大学神经生物学教研室 , 医学神经生物学国家重点实验室 , 上海 200032) 摘 　要 　　本文在 SD 大鼠大脑皮层胶质细胞2神经元共培养模式上 , 以神经元存活、突起生 长、生长相关蛋白243 (growth associated protein243 , GAP243) mRNA 的表达为指标 , 观察了脑啡肽 对胶质细胞神经营养作用的影响 , 并对其机理作了初步探讨。结果表明 , 经脑啡肽处理的胶质 细胞能使神经元的存活计数增加 28 % ( P 0105) , 单个神经元突起总长度增加 11 %( P 0105) , 最长突起长度增加 16 %( P 0105) , GAP243 mRNA 的表达增加 26 % ( P 0105) 。然后又观察了 ( - 6 - 12 ) ( ) 脑啡肽 10 ～10 mol/ L 对培养胶质细胞生成一氧化氮 NO 的影响。结果表明 , 浓度为 - 8 - 10 ( ) 10 , 10 mol/ L 的脑啡肽能明显抑制其生成 P 0105 。结果提示 , 脑啡肽可能增强胶质细 胞的神经营养作用 , 其机制之一可能是通过抑制胶质细胞 NO 的生成。 关键词 : 脑啡肽 ; 胶质细胞2神经元共培养 ; GAP243 ; NO 学科分类号 : Q426 　　胶质细胞是中枢神经系统的主要细胞成分之一 , 参与构成中枢神经元生存的微环境 , [1～3 ] ( 对神经元的发育、生长及损伤后再生发挥着重要作用 。脑啡肽包括甲啡肽 methionine2 ) enkephalin , ME 是中枢神经系统中广泛存在的一类内阿片肽 , 对中枢胶质细胞的激活、增 殖、分泌等均有影响[4～6 ] 。McMillian 综合有关文献报道 , 认为脑啡肽对胶质细胞的作用可 能影响到胶质细胞的神经营养作用 , 从而影响神经元的生长发育与损伤再生[6 ] 。因此 , 我 们拟在中枢胶质细胞2神经元共培养基础上 , 以神经元存活、突起生长、GAP243mRNA 的 表达为指标 , 研究胶质细胞对神经元的营养作用及 ME 对胶质细胞神经营养作用的影响 , ( ) [7 ] 已有报道, 胶质细胞是中枢神经系统中一氧化氮 NO 的主要来源之一 , NO 依其来 源、生成量及氧化还原状态的不同而具有神经保护或神经毒作用 ; 亦有报道 , 体外培养胶 质细胞生成的NO 可引起神经元的死亡[8 ] , 并且 ME 可抑制 NO 的跨膜释放[9 ] 。为此 , 本 实验进一步观察了胶质源性 NO 对神经元存活、突起生长的影响及 ME 对胶质细胞生成 NO 的影响 , 以期探讨ME 影响胶质细胞神经营养作用的机理。 1 　材料和方法 111 　细胞培养 　　大鼠大脑皮层胶质细胞培养 : 按 Conn[10 ]方法行皮层胶质细胞培养。简