人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织一氧化氮合酶表达的影响及机制探讨.pdf

人工合成 E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织一氧化氮合酶表达的影响及其机制探讨 中文摘要 人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤 脑组织一氧化氮合酶表达的影响及其机制探讨 中文摘要 第一部分：人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响 目的：通过改良 Zea Longa 线栓法建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型，应用人工 合成 E-选择素对 SD (Sprague-Dawley)大鼠进行干预，研究其对大鼠脑缺血再灌注损 伤后的脑梗死体积、脑组织含水量及显微结构的影响。 方法： 36 只雄性 SD 大鼠随机分为对照组、模型组和人工合成 E-选择素治疗组， 每组 12 只。通过改良 Zea Longa 线栓法，即：采用颈部旁正中切口，皮片保护迷走 神经，运用多聚-L-赖氨酸包被头端的栓线等，建立 SD 大鼠脑缺血再灌注损伤模型。 通过神经行为学评分、TTC 染色、干湿比重法、 光镜及电镜观察病理切片等方法， 进一步了解人工合成 E-选择素对脑缺血再灌注损伤的干预作用。 结果： Zea Longa 线栓法模型部分改良后模型制作成功率为 88%。缺血区的脑 组织经 TTC 染色后呈苍白色，对照组无梗死灶，治疗组大鼠脑梗死体积为 234±17 mm3 ，较模型组286±21mm3 减少(P0.05) 。对照组脑组织含水量 79.02±0.75% ；模型 组 82.06±0.84% ；治疗组脑组织含水量 80.30±0.65% 。病理结果提示对照组脑缺血区 神经元无损伤表现，模型组缺血区脑组织神经细胞有胞浆水肿、细胞器缺乏、核质深 染固缩等不同程度缺血性改变，治疗组较模型组神经细胞损伤现象明显减少。 结论：改良后的 Zea Longa 线栓法模型制作更简便，稳定性更好，模型成功率更 高。通过人工合成 E-选择素对 SD 大鼠进行干预能够明显减少脑梗死体积及脑组织含 水量，并通过病理切片的观察结果，进一步证实人工合成 E-选择素的对脑组织的保 护作用。 关键词：线栓法；脑缺血再灌注损伤；脑梗死体积；病理改变 I 中文摘要 人工合成 E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织一氧化氮合酶表达的影响及其机制探讨 第二部分：人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织 一氧化氮合酶及血清一氧化氮含量表达的影响 目的：探讨人工合成 E-选择素对大鼠局部脑缺血再灌注损伤中脑组织一氧化氮 合酶（NOS ）及血清中一氧化氮(NO)含量表达的影响及其作用机制。 方法：采用改良的 Zea Longa 线栓法建立 SD 大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型， 将 90 只雄性 SD 大鼠随机分为对照组、模型组和人工合成 E-选择素治疗组，每组 30 只。各组大鼠在脑缺血 2h 再灌注 2h、6h、12h、24h、72h ，5 个时间点分别提取血 清标本和脑组织标本。采用硝酸盐还原法测定血清中一氧化氮含量和免疫组化法检测 缺血区脑组织神经型一氧化氮合酶（nNOS ）、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性细胞数。 数据采集后应用 SPSS13.0 分析软件进行统计分析。 结果：1. NO 结果 （1）对照组 NO 变化无统计学意义。（2 ）模型组脑缺血 2h 再灌注 2h~24h 区间NO 含量呈上升趋势，24h 时达到高峰，72h 已有所降低但仍高于 对照组，各时间点与对照组比较明显增高(P0.0 1) 。(3)治疗组血清中 NO 含量变化趋 势同模型组，数据统计结果较模型组减少(P0.05)，较对照组增多 (P0.01) 。 2. NOS 结果 （1）对照组nNOS 、iNOS 阳性细胞数变化无统计学意义。（2 ）模 型组 nNOS 阳性细胞在脑缺血 2h 再灌注 2h 后开始表达，12h 达到高峰，24h 开始降 低，各时间点与对照组比较明显增高(P0.0 1) ；模型组iNOS 阳性细胞在脑缺血2h 再 灌注 2h 开始出现，并持续增多，随着时间延长呈上升趋势，在 24h 达到高峰，72h 出现下降，各时间点与对照组比较明显增多(P0.0 1) 。（3 ）治疗组各时间点nNOS 、 iNOS 阳性细胞数变化趋势同模型组，但较模型组阳性细胞