束缚应激大鼠中枢AMPA受体的相关蛋白变化及肝主疏泄关系.pdf

中文摘要 中文摘要 应激是机体在受到各秸强烈因素(即应激原)刺激时，体内出现以交感神经兴奋和 垂体一肾上腺皮质分泌增多为主的一系列神经内分泌反应，它对生物的存活具有十分重要 的意义。适宜的应激反应有助于提高个体对环境的适应能力；过度的尤其是慢性应激会 导致不同程度的生理、心理障碍，甚至引起躯体疾病。由于慢性应激是许多疾病发生和 发展的重要因素，又与亚健康状态直接相关．上个世纪80年代以来，国内外学者对其进 行了大量的研究。应激涉及了人体的多个系统，在不同应激原、不同个体、不同的环境 下，可能导致的结果也不同，这给预防和治疗应激性疾病造成了困难，而中医药的整体 调整、辨证论治、个体化诊疗等理念在这方面己显示出了更大的优越性。本课题为国家 方面及其相互关系进行了理论探讨和实验研究。 一、理论研究 肝主疏泄是jj千脏的核心生理功能，疏泄功能失常致病范围广泛，硫泄不利、气机失 调是其基本病理机制。结合信息控制系统理论，通过对文献的回顾分析，认为肝主疏泄 的生理学基础如下：(1)边缘系统是肝主疏泄的调控中枢，是动机和情绪产生的发源地， 它～方面接受内外环境的刺激，及时做出反应；另一方面接受体内状态的反馈信息，调 整其状态，产生适应性反应。(2)边缘系统的信息传递主要通过边缘系统一脑于一自主神 经通路和交感一肾上腺髓质通路来实现，其中自主神经通路又分为交感神经通路和副交感 神经通路。(3)平滑肌系统是肝主疏泄的效应器，通过平滑肌的舒张和收缩活动，最终 完成在边缘系统控制下的整个疏泄过程。(4)糖皮质激素通过对边缘系统兴奋性和敏感 性的影响，调节着肝主疏泄功能的状态和强弱。 应激反应涉及了五脏，但以心肝肾三脏最为重要。在应激过程中，心负责感觉和知 觉的形成，并通过认知评价形成决策，传至皮层下中枢；处理内脏和躯体反馈信息：接 受肾上腺皮质激素的调节。肝负责心下传的决策指令，在边缘系统形成情绪，并影响蓝 斑一去甲肾上腺素神经元／交感一肾上腺髓质系统，引起平滑肌的收缩、血液的重新分布， 完成应激心理上、生理上的反应，同时亦影响下丘脑一垂体一肾上腺皮质轴使肾上腺皮质 激素分泌增多，是应激反应形成的核心。肾主要通过肾上腺皮质激素完成应激的适应性 反应，：井调节着心、肝对其调节的敏感性。肝肾均藏相火，在应激反应中常互枢影响。 中医学认为气机的变化是机体在应激反应中所出现的重要的生理和病理反应，并导 致一系列其他的生理或病理改变，而肝为气血调节之枢，肝脏功能的正常与否，直接关 系到机体其他脏器的生理功能以及疾病的发生、发展和转归。因此我们课题组首先提出 “应激从中医脏象理论分析，当责之于肝”的论断，认为肝是人体应激梳制的调节中心， 肝脏对气机、血液和情志等的影响调节人体的应激反应。另一方面，应激反应强度和时 程不同，所反映的证候也不同。从文献回顾看，对应激损害的中医治法主要为疏肝、补 肾、健脾、补气、调心等，结合应激反应的三个阶段的临床表现，认为在应激反应初期 的临床表现类似于中医肝郁气滞证候。进入抵抗期后，在肝郁气滞的基础上又发生了各 种变证如脾虚，痰结、血瘀等，随着应激原的持续存在和消耗的逐渐积累，可由实转虚、 II 束缚应激大鼠中枢AMPA受体及相关蛋白的变化与肝主琉泄的关系 由肝及脾，转化为以脾虚为主的证候。如果消耗严重，人体机能严重下降，可进入衰竭 期，主要表现为阳虚证候。前期工作显示，慢性束缚应激7天后可出现类似于肝郁气滞 证候表现，2I天后则类似于肝郁脾虚证候，与此结论相符。 二、实验研究 边缘系统与下丘脑在结构上存在着复杂的关系，功能上也密切相关，为应激系统的 高位调节中枢，特别是海马和杏仁核部位。慢性应激可造成海马锥体细胞树突萎缩、突 触结构重组、齿状回颗粒细胞神经发生受抑制、海马神经元变性丢失等，特别是突触结 构的重组，或称突触可塑性，是应激反应从应激适应过程转化为应激损害的关键因素。 在脊椎动物的中枢神经系统中，谷氨酸受体(61uRs)调节着大多数的突触传递。AMPA 受体是离子型谷氨酸受体的一个类型，其在突触后变化对LTP的表达以及突触可塑性的 重要影响已被广泛认可。因此本课题选择了AMPA受体的GIuR2亚基和两个调节蛋白作为 研究对象，以慢性束缚应激塑造肝郁证候模型，运用免疫组织化学、Westernblot分析 及RT—PCR等方法，从蛋白和基因水平，观察了逍遥散对束缚应激状态下AMPA受体及相 关调节蛋