新型生物材料的制备与应用的分析.pdf

—— !塑三一一—— 新型生物材料的制备和应用研究 摘要 本论文共分五章，包括仿生智能生物材料、溶胶凝胶生物材料和纳米荧光 探针的研究进展：新型环境敏感高分子的合成与应用；溶胶凝胶生物材料的合 成与应用和荧光团杂化纳米二氧化硅微球的合成与应用：研究工作的结论与展 望。 第一章为绪论，评述了生物材料(biomaterials)对现代生物工程和医学工 程发展的重要意义及该领域中已取得的一些令人激动的研究成身b涔章分为三 部分。第一部分介绍了仿生智能材料一环境敏感性高分子的作用机理、合成方 法、性质研究和生物学应用研究；第二部分对溶胶凝胶技术作了简介，并对近 年来溶胶凝胶技术固定生物活性物质的研究进行了综述：第三部分评述了纳米 探针作为生物标记的研究进展。并在此基础上提出了本论文的研究设想。 、 第二章主要研究新型环境敏感高分子的合成与应用。f该章的研究成果拓宽 了环境敏感高分子的应用范围，对发展环境敏感高分子在生化分析和生物工程 方面的应用具有积极意义。本章分为两节。 第一节合成了末端带有活性羧基的寡聚Ⅳ．异丙基丙烯酰胺寡聚物 丙酸的比例决定，且每个分子上只含有一个活性羧基。0NIPAAm的最低临界 Solution Critical 溶解温度(Low 末端的羧基通过双功能试剂，如碳二亚胺(EDCI)等活化后与生物分子如抗 体、寡聚核苷酸或小分子有机物模拟酶偶联，得到功能性的高分子。(1) 定抗体所发生的自聚现象，及高分子链对抗体．抗原特异性结合的空间位阻作 用，提高了固定抗体的免疫活性。考察了抗体在ONIPAAm上的固定方式、周 f 中文擅蔓 定抗体的免疫学活性及抗体、抗原在高分子上的非特异性吸附和消除。在这些 研究的基础上，建立了热敏相分离荧光免疫分析鼠IgG的方法，测定鼠IgG的 工作曲线为0．5-1000 ng／mL，检测限为0．2 方法为核酸杂交产物的快速分离、检测、提纯提供了一个合适的载体。(3)由 s～。测定心q 催化活性，催化H20：氧化对-羟基苯丙酸的反应的≮。值达到了7．0 的工作曲线线性范围为】+0x104．1．5x104mol／L，检测限为4．2x10一moI／L。 第二节将N．异丙基丙烯酰胺与甲基丙烯酸(MAA)通过自由基共聚反应， 合成了37 以N．羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯(NAS)活化后，固定在共聚物上，并考察了 感相分离荧光免疫分析的新方法。对人血清中乙肝表面抗原(HBsAg)和a-甲 ng／mL和0．04ng／mL。测定结果 胎蛋白(AFP)进行了测定，检测限分别为0．2 与酶联吸附免疫分析法进行了比较，结果+分吻合。，y一≯ 第三章主要研究溶胶凝胶生物材料的合成与应用。l该章的研究成果对溶胶 凝胶生物材料在生物传感器、酶治疗、药物缓释和生物微反应器方面的进一步 应用具有重要的指导作用。本章分为三节。 第一节我们以聚乙二醇(PEG)在水溶液中形成预组装模板，以四甲氧基 硅烷(TMOS)为前体，合成了纳米复合溶胶凝胶Si02一PEG。考察了反应物中 PEG含量对形成的溶胶凝胶材料孔径和孔径分布的影响。PEG添加量为5％时， rim)，平均孔径为6rlln。将抗庆大霉素抗体固定 Si02-PEG的孔分布较窄(3-8 于合成的溶胶凝胶材料中，考察了抗体的活性和与庆大霉素的结合能力。 II !墅堕 —— 一—— SiO，一PEG中抗体与抗原结合的亲和常数^；值，是固定在无机si02中抗体墨值的 50倍。进一步的研究表明，由于PEG的隔离作用，Si02-PEG表面对庆大霉素的 非特异性吸附作用显著减弱。在此基础上建立了基于si02-PEG生物材料的流 动注射荧光免疫分析新方法