NaC1处理下几种红树植物渗透调节特征和蛋白表达差异研究及拟南芥AtNHX的亚细胞定位.pdf

摘要 摘要 红树植物由于长期生活在高盐度的海水环境中，具有十分有效的耐盐机制， 是研究植物尤其是木本植物耐盐机理的绝好材料。本文研究了不同浓度NaCI处 理对秋茄(Kandeliacandel)、木榄(Bruguiera corniculatum)四种红树植物叶片渗透调节特征的 marina)和桐花树(Aegiceras 影响；分析了不同浓度NaCI处理45d后三种红树植物(秋茄、桐花树和木榄) 叶片的蛋白质组；研究了模式植物拟南芥Na-／Ⅳ逆向转运蛋白AtNHX2、 A小iHX3、A悄HX5和AtNHX6的亚细胞定位。主要结论如下： 1．本实验对不同盐浓度处理下四种红树植物幼苗叶片的渗透调节机制进行 mM mM 了研究。实验中分别采用无盐(O NaCl)、中等盐度(200NaCI)和高盐 mM mM 度(用500NaCI处理秋茄、木榄和桐花树；600NaCI处理白骨壤)三 种不同的盐浓度，分别在盐处理后0、7、15、30和45d取样，分析四种红树植 物叶片中各种无机离子和有机渗透调节物质的含量，以及它们对总渗透势的贡献 率，并比较了非泌盐红树与泌盐红树在渗透调节机制上的异同。 研究结果表明，非泌盐红树与泌盐红树表现出不同的渗透调节机制，即在高 盐度处理下，无机离子对泌盐红树植物的渗透调节贡献作用比非泌盐红树植物更 加重要，高盐度处理45d后，无机离子贡献率在泌盐红树植物中平均比非泌盐 红树植物中高出约16％，并且，非泌盐红树植物的无机离子贡献率在高盐度处理 下低于中等盐度处理。该结果表明非泌盐红树植物对Na+和Cl‘的耐受能力低于 泌盐红树，在高盐度下更多转向对有机渗透调节物质的积累，而泌盐红树植物体 内可能存在特殊的耐受高浓度Na+和Cl‘的机制，有利于它们更好的适应高盐度 环境。 非泌盐红树与泌盐红树在渗透调节机制上还存在相同之处，即无机离子是四 种红树植物应对盐生生境的最重要渗透调节物质，Na+和CI。在其中占了最大比 例，贡献了超过一半的渗透势：有机渗透调节物质的作用较小，并随着NaCi处 理浓度的提高和时间延续而逐渐减低。K+对四种红树植物的渗透调节作用在盐处 理下都被减弱，Na+／K％匕值在实验后期都大于2，但是，K+在四种红树植物中都 保持了较高的含量，在各种处理条件下都高于100mM，这可能是红树植物有效 摘要 的耐盐机制之一；可溶性糖和K+都是四种红树植物中无盐处理时重要的渗透调 节物质，但它们的渗透调节贡献率受盐处理而降低，在无盐处理下的贡献作用更 大；脯氨酸的含量受盐处理都提高，但渗透贡献率不足O．2％，对渗透调节的贡 献作用不大。 不同红树植物还具有不同的渗透调节特性。如总游离氨基酸的贡献率在秋茄 和白骨壤中受盐处理提高，在木榄和桐花树中则受盐处理而降低。从整个细胞水 平看，甘氨酸甜菜碱(GB)对渗透调节的作用不太大，但是考虑到它在胞质中 的特异分布，GB可能对白骨壤叶片细胞质的渗透调节有非常重要的作用。从秋 茄叶片中的松醇和甘露醇以及桐花树叶片中的有机酸对总渗透势的贡献率来看， 多元醇和有机酸在红树植物中的渗透调节作用也十分有限。 mM、200 2．通过双向电泳分离及质谱分析鉴定，对0 mM和500mM三种 不同浓度NaCI处理45d后红树植物(秋茄、桐花树和木榄)叶片的差异蛋白质 组学进行了研究，这是首次对秋茄和桐花树蛋白质组研究的报道。结果表明，不 同浓度NaCI处理导致三种红树植物的2．DE凝胶表达图谱发生了变化，其中秋 茄叶片中有22个蛋白质表达量改变，桐花树和木榄叶片中分别有21个和22个 shock 在高盐胁迫下表达量发生改变，表明热激蛋白(Heat proteins，HSPs)在 秋茄适应盐生环境的过程中起了作用。经MALDI．TOF／MS分析鉴定，桐花树叶 片核糖体失活蛋白(Ribosome inactivating