清脑滴丸治疗腔隙性脑梗死的临床观察及对脑缺血MARCKS磷酸化的调节.pdf

中文摘要 1 中文摘要 背景 由于近年来中风病防治知识的普及，以及对中风病危险因素的防控，尤其是 高血压病的早期积极治疗和有效控制，急性脑血管病发病越来越有轻型化的趋 势。随着影像学检查手段的不断进步，特别是MRI在临床的广泛应用，腔隙性脑 Infarction 梗死(Lacunar LI)的诊断率大大提高，其在脑血管疾病中所占比 例明显上升。 在王永炎院士的带领下，从“七五攻关”开始，经过“八五”、“九五”到现 阶段的“十五”攻关，对中风病急症、危重证的临床研究已有较大的进展，但对 早期轻证的发病特点，证候学，辨证论治等的研究尚待完善，因此对中风病急性 期轻证的中医药研究显得更加重要。LI临床症状较轻，相当于中医中风病之轻 证，证类诊断为中经证或中络证。在临床中中风病轻证占有相当高的发病率。根 据“九五”期间研究成果，针对急性期LI的临床特点，我们提出熄风清热，化 痰活血的治疗原则，研制出清脑滴丸(由天麻、栀子、黄连、胆星、川芎等组成)， 用于治疗LI的临床观察。 脑梗死缺血缺氧引发了神经元的变性以及细胞的死亡。近年来的研究发现， 兴奋毒性、钙超载和代谢障碍为其主要机制，与之相对应而产生了“神经保护” 的概念。神经元保护在蛋白分子水平上所起作用已得到一定程度认可，通过药物 不同作用途径阻断缺血后细胞坏死，延长细胞生存能力，既可用于高危患者的预 防，也可促进后期神经元功能的恢复，以达到治疗目的，而中药具有多途径、多 靶点调节缺血后脑内蛋白变化，打断毒性信号传导通路的作用，己经成为当前神 经细胞保护的研究热点。 alanine—richCk：haSe stoylated MARCKS(myri substfate)是蛋白激酶 信号转导通路尤其是MARCKS磷酸化动态变化与脑生长发育有密切关系，那么在 病理状态下如脑缺血缺氧导致细胞死亡、功能丧失时，MARCKS磷酸化在中枢神 经系统的变化至今尚未有明确报道；而中药在脑缺血状态下对MARCKS磷酸化变 化能否产生影响，未见明确论述。故本实验研究提出以上假说并加以验证，从蛋 白水平探讨中药缺血保护机制。 目的 (1)通过临床观察，探讨急性期LI的发病特点、证候学特征； 2 清脑滴丸治疗腔隙性脑梗死的临床观察及对脑缺血MARCKS磷酸化的调节 (2)对清脑滴丸治疗腔隙性脑梗死的临床疗效进行初步观察： 一步观察清脑滴丸对MARCKS信号转导通路的影响，从蛋白水平探讨中药对急性 脑缺血保护的作用机制。 方法 临床研究部分设计前瞻性方案，按照公认的中医、西医诊断标准，制定纳入、 排除、剔除标准，采用随机、平行对照的方法，将66例LI患者随机分为33例 清脑滴丸加胞二磷胆碱的治疗组和33例拜阿司匹林加胞二磷胆碱的对照组，疗 程为2周。疗效评价指标采用神经功能缺损程度评分和中医临床证候计分法，制 定并采用统一的病例报告表；依据标准分别为：①腔隙性脑梗塞的诊断标准参照 1995年中华医学会第四次全国脑血管病学术会议修订的《各类脑血管疾病诊断 要点》；②中风中经络的诊断标准符合1996年国家中医药管理局脑病急症协作 组起草制订的《中风病诊断疗效评定标准》；③中风病证候诊断标准依据(国家 科委攻关项目“85—91 9—02—01中风病证候学与临床诊断的研究”课题组、国 家中医药管理局脑病急症科研协作组制订的)《中风病证候诊断标准》；④神经 功能缺损程度的评价标准是在美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)的基础上 进行改良，以适合LI的临床研究。 实验研究部分采用改良Kaneko法建立多发性脑梗塞动物模型，应用清脑滴 丸进行干预，同时与尼莫地平作对照研究；运用光学显微镜及透射电子显微镜观 察造模后大鼠海马组织的病理变化及细胞超微结构的改变，应用免疫组织化学和 固定化蛋白印逮法检测MARc愁蛋白及其磷酸化在大鼠造模后海马及皮层中昀表 达变化，进而观察清脑滴丸对其调节作用。 以上临床及实验研究数据均应用SPSSl