动态光散射术在生物大分子测量上的应用.pdfVIP

摘 要 动态光散射技术是一-fl新兴的实验技术，利用该方法能快速、准确地测定 溶液中大分子的平动扩散系数，从而得知其大小或流体力学半径及其分布。 本研究工作主要参与完善改进了一台本实验室自行研制的小型低强度激光 光子相关谱仪。与现有的同类型仪器相比，该仪器采用双层折射率样品匹配池 减少了杂散光的干扰；采用带梯度折射率透镜的单模光纤接收、传输散射光信 号提高了散射光的收集传输效率；用低强度的激光避免了对样品的辐射损伤， 同时可以使激光器和系统集成在一起，整个系统小型实用。 用标准的不同粒径的聚苯乙烯乳球定标了设计的系统，系统的测量范围从 几个纳米到一个微米都很精确。 提出了采用格雷码编码遗传算法对动态光散射测量的多粒径分布进行反演 运算，数字测试的结果和聚苯乙烯乳球的实验结果表明，该算法能够精确的反 演出各种分布的粒子分布图象。与标准遗传算法和反演蒙特卡诺算法相比，该 算法具有较高的搜索效率，能够用较少的迭代次数快速搜索到最优解。格雷码 编码遗传算法是一种更有效的多粒子随机反演算法。 使用该系统研究了人血清白蛋白分子的扩散系数在不同蛋白浓度和PH值 条件下的扩散系数。实验和分析结果表明库仑力对蛋白质的扩散起主要作用， 在等电位点下(PH=5．2)库仑力的影响消失，蛋白质的扩散系数最小；在等电 位点测量出扩散系数随浓度的增加而线性减小，主要原因是蛋白质问的库仑排 cm2山为外推至零浓 D。=Do[1一(o．00194±o．00008)(7】，Do=(6．74±o．01)x10’7 度下23℃时蛋白质的扩散系数，这里C为蛋白质浓度，实验测得人血清白蛋白 的半径为3．44_+0．Olnm。这项研究有助于推动诊断‘肾脏病的早期发现。 利用动态光散射技术研究了牛血清白蛋白分子的扩散系数在不同强度离子 溶液中随着蛋白分子浓度变化的规律。结果表明在低离子强度环境中蛋白的扩 散系数随蛋白的浓度增加而增加，随着离子强度的逐步增大，蛋白分子的扩散 系数随其浓度的增加而减小。利用平均势场理论的两体硬球相互作用模型解释 了蛋白分子的相互作用变化规律：随着离子强度的增加，离子氛厚度减小，蛋 摘要 白分子间的相互作用由排斥变为吸引，蛋白开始聚集。根据扩散系数随蛋白浓 度变化的斜率与离子浓度变化的相关性，回归出了蛋白相互作用参数，蛋白所 带的有效电荷z产一9．Oe、HⅫaker常量=2．8KBT。这项工作说明了动态光散射是 研究蛋白分子相互作用的一种有效技术。 关键词：动态光散射；扩散系数；粒径：遗传算法；多粒子反演；人血清白蛋 白；蛋白相互作用 ABSTRACT ABSTRACT can anew measure technique．It lightscattering(DLS)isexperimental Dynamic in diffusioncoefficientofmacromoleculesolutionsand thesize exactly,and rapidly canbeobtained． or ofmacromolecule radius dynamic The contentof workareas main the