分子印迹聚物富集新免蛋白pfkbp23及合成dna梳状高分子的研究.pdfVIP

摘要 本人的工作分为两个部分，第一部分的工作内容是用蛋白质印迹聚合物分 离富集天然蛋白FKBP23。第二部分的丁：作内容是在DNA链的指定位点上修饰 高分子链PEG的研究。 分子印迹技术源于20世纪40年代的免疫学。它是一种模拟抗体．抗原相互 作用的人工生物模板技术，可以针对不同的目的，人工合成出具有特定选择性 识别位点的模板聚合物。以蛋白质为模板的相关研究多集中在天然复杂生物素 的富集和提取上。目前为止，用分子印迹聚合物代替生物抗体来研究蛋白质与 蛋白质之间相互作用的报道还很少见。 第一部分的工作是用分子印迹技术从猪肝中提取和富集天然蛋nFKBP23。 合成具有羧基和吡啶双重识别基团侧链的辅助识别聚合物链(ARPCs)。将在大肠 FKBP23(FK506 23)模板蛋白与其进行白 杆菌中克隆表达的pig bindingprotein 组装，而后于固相载体上，将该组装体与丙烯酰胺进行交联聚合反应，洗脱模 板后得到蛋白质印迹聚合物，以其作为抗体取代物吸附内质网体(Endoplasmic 这表明了用克隆蛋白质做模板制备的分子印迹聚合物可以用来富集内质网体中 的天然的微量蛋白质。 目前含DNA高分子的研究主要利用共价键和非共价键作用(静电作用)合 成复合物，用于运输治疗基因，DNA检测，合成新型纳米材料和合成胶体。这 些复合物包括DNA—CL自组装复合物，直链状和梳状嵌段共聚物。DNA被修饰 的位点基本都在链端的碱基上，也有少部分在链端的糖环上。然而，目前还没 有把高分子链接枝到DNA的磷酸骨架上构建高分子材料的研究报道。 在第二部分的研究中，我们将带有炔基和重氮基这两种官能团的活性小分子，采用无 催化的O-H插入反应，特异性地修饰到DNA分子磷酸骨架磷原子的羟基上，采用核磁共振 和MADIL—TOF对其进行表征。在成功修饰了小分子屙，采用click反应，将端基修饰上叠氮 基团的高分子链PEG接合到修饰后的DNA链上，形成梳状结构。 关键词：分子印迹，FKBP23，DNA高分子复合物，PEG，梳状结构 Abstract Abstract workis intotwo My separatedparts． Themolecular came fromthe1940s isa imprintingtechnique Immunology．It artificial simulatesthe interaction．We biologicaltemplate，which antibody-antigen can thedifferent withthe selective synthesize templatepolymer specific recognition on enrichmentandextractionof naturalbiotins．mostofthe sites．Focusing complex scientistsdon’trealizethevalueof theinteractionbetween withit． studying proteins Thefirst of workwasbasedontheuseof partmy protein．imprinted