功能核酸探在可视化检测中的应用.pdfVIP

摘要 摘要 Nucleic 功能核酸(FunctionalAcid，FNA)是指一类具有化学活性的核酸分 子。上世纪，随着DNA双螺旋结构的揭示，DNA化学合成的成熟，以及随后 DNA体外筛选技术的发展，DNA分子不再仅仅作为具有储存和传递遗传信息功 能的生物分子被生物学家解读；DNA的化学属性也被开发出来，化学家将DNA 作为功能核酸分子应用到分子识别，纳米材料自组装、仿生材料等诸多化学领域。 DNA分子都由体外筛选技术获得。近年来，分析工作者更是利用核酸分子的识 别功能，发展了多种基于核酸分子的生物传感器。这些传感器通过可视化检测、 电化学、荧光成像等诸多手段表征实现了从小分子、金属离子、蛋白、核酸等多 种分子的高选择灵敏检测。其中，基于核酸分子生物传感的可视化检测由于其成 本低廉，操作简单，响应迅速并且不需要昂贵、复杂的仪器，成为最近研究的热 门和重点。本文基于这些工作，探索和发展了两类基于功能核酸分子生物传感的 可视化检测方法。 (1)发展了一种新型的DNAzyme水凝胶生物传感器用于铜离子的可视化 检测。首次将DNAzyme应用于水凝胶领域，应用DNAzyme为水凝胶的交联剂， 利用铜离子对DNAzyme循环酶割的雪崩效应破坏水凝胶的结构，实现对水凝胶 体系从凝胶状态到溶液状态之间的调控，通过金纳米颗粒的扩散作用，可在较短 的时间内实现对铜离子的可视化检测。检测限达到10I-tM，低于美国环境总署 (EPA)对饮用水中允许铜离子浓度的限制标准(20I．tM)，也低于我国国家生活 饮用水标准1．0mg／L并且具有良好的选择性，不受其他金属离子的干扰，这使得 该体系在实际复杂样品的测试中存在很大的发展潜能。 (2)探索了一种基于胶体金层析试纸条的生物样品快速可视化检测。跳出 原先胶体金层析试纸条在抗原抗体方面应用的限制，充分利用DNA作为核酸适 体的优势，首次将变构探针(aMB)这一概念应用到胶体金层析试纸的检测中来。 变构探针是一条包含链霉亲和素(streptavidin)核酸适体序列以及目标物响应序列 的分子信标，这种信标只有在目标DNA存在时，变构探针的构象发生改变，才 l 摘要 作为层析试纸测试线上的载体，将胶体金上修饰变构探针，利用变构探针和 streptavidin结合与否来验证目标物的存在与否。从而拓展了胶体金层析试纸条应 用的通用性。 关键词：功能核酸生物传感可视化 n Abstract Abstract Inlast totherevealofDNAdoublehelix century,thanks structure，the DNAautomatic and the of／n consummationof synthesissubsequentlydevelopment vivo acidshavenot beenunveiled as selection,nucleic only bybiologists andtransfer afunctional biomolecularsthatstore code；as molecular,nucleic genetic acidsalsohavebeen chemistsinvariousfields molecular exploitedby including