新型葡萄糖物传感器的构筑、机理及应用研究.pdf

摘要 摘要 葡萄糖是动植物体内碳水化合物的主要组成部分，葡萄糖的定量测定在临床 化学、生物化学和食品分析中都占有很重要的地位，葡萄糖的分析与检测方法一 直是研究的热点之一。随着人们生活水平的提高和老年人口的增加，糖尿病发病 率呈上升趋势，己成为仅次于心血管病和癌症的第三大危险疾病，其诊断和治疗 已成为了医学界面临的重大课题。因此，快速、准确、方便地检测血糖含量，从 而有效地对糖尿病进行监测和治疗变得越来越重要。之前，人们己经为葡萄糖的 检测做出了很多重要的研究。 在已有检测方法中，生物传感器由于具有灵敏度高、重现性好、操作简便等 优点，在各种检测方法中扮演着重要的角色。它的工作原理是基于对固定在特定 载体上的葡萄糖氧化酶(GOx)催化氧化葡萄糖时产生的过氧化氢电流的检测。 因此，葡萄糖氧化酶的固定化是传感器制备过程中最关键的步骤之一。 纳米材料是指在三维空间中至少有一维处于1．100纳米尺度范围或由它们作 为基本单元构成的材料，是处在原子簇和宏观物体交界的过渡区域。纳米材料具 有表面效应、体积效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应，并由此产生出许多 特殊性质。由于纳米材料特有的光、电、磁、催化等性能，引起了凝聚态物理界、 化学界及材料科学界的科学工作者的极大关注。因此，纳米材料在太阳能电池、 催化、电子信息技术及传感器材料等方面有着深入的研究和广阔的应用前景，其 中传感器是纳米材料可能利用的最有前途的领域之一。纳米材料奇异的特性，使 得生物传感器的灵敏度、检测限和响应范围等性能指标得到了很大的提升。纳米 材料为生物传感器的发展带来了新的契机，创造了更为广阔的空间。 本论文通过链接反应(Click 膜对葡萄糖氧化酶进行固定化，并利用水热法合成了树叶状CuO纳米材料、 ZnO／Au复合纳米材料和纳米W03，并将其应用于葡萄糖生物传感器的研究与应 用。通过扫描电子显微镜、透射电子显微镜、X．射线衍射光谱、电子衍射光谱和 紫外可见分光光度法对合成的纳米材料形貌和组成进行表征，利用循环伏安法、 交流阻抗、安培检测法等对葡萄糖的含量进行了检测和分析。在本论文中，葡萄 摘要 糖生物传感器的稳定性，酶的活性都得到了很大提高，对葡萄糖的检测也实现了 高灵敏度和低检测限。基于酶与电极间直接电子传递的电流型生物传感器能够简 单直接地获取信号，本论文对GOx与纳米材料间的直接电子传递行为进行了考 察，探讨了纳米材料对GOx直接电子传递行为的影响，并对葡萄糖氧化酶／纳米 在此研究的基础上研制和开发了无创血糖仪。本论文共分为八章： 簇__拳绪落 本章内容主要包括葡萄糖检测技术的现状、葡萄糖生物传感器的发展、酶固 定化技术的研究、纳米材料的制备及其在葡萄糖生物传感器的应用与发展。文中 简单介绍了葡萄糖检测方法的研究与进展；葡萄糖生物传感器的分类和发展；酶 固定化技术的最新研究成果，重点描述酶固定化可以解决的一些问题；纳米材料 的分类、性能和制备，着重阐述了纳米材料的水热合成及其应用。 第二章基于链接反应露定的葡萄糖氧化酶及其应甩予葡萄糖生物佳感器的磉 籀 本章利用链接反应(Click 于金纳米粒子(AuNPs)表面，并将其应用于葡萄糖的检测研究。Cu(I)催化 叠氮化合物与末端炔基形成碳亚二胺，该反应条件温和、选择性强。实验表明， AuNPs具有良好的生物兼容性，能够有效地促进电子传递，修饰了AuNPs的酶 传感器，响应速度快(o．5s)，线性范围宽(5 mM，R2=0．9990)，最 I．tM．1．82 低检测限低(O．5 1．tM，S／N=3)，稳定性好；链接反应固定的GOx有良好的酶动 mM。 力学响应，其表观米氏常数(KM狮)为4．0 ％∞一一一………～。P………。～∽≈”一……”一_％≯∞”％∽∽+”…………““—”8。一……。_oP…一～～……4％％％ 第三章超声条传‘夏合成的；PAMA№，复合维米材料及其应履量葡萄糖生镌 够 叠 黪感器的研纛 本章在超声辐射条件下合成了第四代的聚酰胺胺(G4，PAMAM)／金纳米 粒子(AuNPs)复合纳米材料，并