丁苯酞对血管性痴呆大鼠海马区血红素氧合酶-1表达影响.pdf

摘要 丁苯酞对血管性痴呆大鼠海马区血红素氧合酶．1表达 的影响 研究生陈艳芳 导师刘合玉 郑州大学第二附属医院神经康复科 河南郑州450014 摘要 背景和目的 目前，我国老龄化人口不仅数量多，而且发展速度快，已居世界首位。从 口的比例从10．2％提高到11．6％，占全球老年人口的21．4％。随着人口老龄化的 导致痴呆的第二大病因。加之本病致残率高、病程长、治疗费用高等特点，使 社会和家庭负担较重，因此VD的研究对于预防痴呆发生，减少社会和家庭负担， 改善患者生存质量，有重大意义。 VD的具体发病机制目前尚不完全清楚，目前研究认为，VD与兴奋性氨基 酸毒性、炎症反应、自由基、胆碱酯酶和细胞凋亡、线粒体功能障碍等学说有 关。近十几年来研究证实内源性CO是继NO之后的又一重要气体分子，主要由 血红素氧合酶(heme oxygenase，HO)催化分解血红素而产生，能减轻细胞损伤， 扩张毛细血管，改善循环，广泛参与体内的生理病理过程，是一种新型的神经 递质，是近几年来神经科学研究的一个新的热点问题。 血红素氧合酶是内源性CO产生的关键酶，它存在着若干个亚型。20世纪 80年代未有人发现了HO的一个亚型即HO．1，并证实其具有和热休克蛋白P32 相同的结构，这个发现引起了人们对HO作为应激反应蛋白新的认识。近几年来 随着人们对HO／CO系统的深入研究，发现HO．1能发挥抗氧化作用，对心血管、 摘要 肝脏、神经系统的保护作用及机制是近几年的研究热点。但是在VD大鼠模型中， 是否存在着HO．1及其变化，以及丁苯酞是否能通过影响HO．1的表达而改善学 习记忆的能力，目前还未见报道。本研究通过建立血管性痴呆大鼠模型，观察 HO-lmRNA表达的变化，探讨丁苯酞治疗VD的具体机制。 方法 本研究分为两个部分。第一部分，以清洁级SD大鼠为研究对象，采用双侧 颈总动脉永久性结扎的方法制备VD模型，随机分为假手术组、模型组、丁苯酞 组。造模成功2月后丁苯酞组给予丁苯酞注射液6mg／kg腹腔注射给药，每日一 次，连续30天；模型组腹腔注射O．9％的生理盐水与丁苯酞注射液等剂量，连续 30天；假手术组不给药。各组大鼠分别在腹腔注射结束后应用MG．2Y．型迷宫 实验进行学习和记忆能力测试。学习测试：大鼠受到电击后从起步区逃至安全 区的反应为J下确反应，以达到连续lO次中有9次均为正确反应所需的电击次数 表示其学习能力。记忆测试：学习测试后大鼠休息24h，同法检测记忆能力，记 录每只大鼠lO次电击中的正确反应次数为记忆成绩。第二部分采用RT．PCR观 察大鼠海马区HO．1mRNA表达的变化，HE染色法观察海马区细胞形态的变化， 采用统计学方法，比较其差异； 挂蟹 皇口木 (1)Y迷宫试验：模型组大鼠的学习和记忆能力均下降，具体表现为学习 达标所需电击次数最多，但是24h后的记忆的J下确次数最少；假手术组学习达 标所需的电击次数最少，但是记忆J下确的次数最多；丁苯酞组居中。其中模型 组与假手术组相比较有显著性差异(P0．01)；丁苯酞组较模型组学习记忆能力 改善(P0．01)。 (2)HE染色：假手术组海马CAI区神经元结构清晰，排列紧密，细胞结 构完整；模型组海马CAl区结构紊乱，排列疏松，数目最少，细胞核固缩、深 染，胞浆周围可见空晕：丁苯酞组居中，神经元数量较多，排列较紧密，细胞 核圆，核仁清晰，仅见少量固缩变性的神经元。 酞治疗后HO—l mRNA表达明显增高(P0．01)。 结论 1．丁苯酞可明显改善VD大鼠的学习记忆能力； Ⅱ 摘要 2．大鼠慢性缺血可诱导脑组织HO．1mRNA快速高效的表达； 3．丁苯酞对VD大鼠的保护作用可能通过提高HO．1基因的表达，从而提 高抗氧化酶活性、提高抗氧化应激能力、抗自由基水平等来实现。 关键词 丁苯酞血管性痴呆 海马HE染色血