Bufalin对人食管癌细胞4EBP1活化及其凋亡的影响.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 研究论文Bufalin对人食管癌细胞4EBP1活化及凋亡的影响 前言………………………………………………………………………9日{J吾……………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………．22 附图……………………………………………………………………·24 附表……………………………………………………………………·30 讨论……………………………………………………………………·33 结论……………………………………………………………………·36 参考文献……………………………………………………………………·36 综述 mTOR信号通路与肿瘤的相关性研究…………………………·39 致谢…………………………………………………………………………·46 个人简历……………………………………………………………………·47 中文摘要 Bufalin对人食管癌细胞4EBPl活化及凋亡的影响 摘 要 食管癌是一种常见的恶性肿瘤。我国平均每年发病人数约250，000人， 约占全世界年均发病人数的50％以上。目前普遍认可的是，食管癌的发生 是多因素、多基因、多阶段的复杂的发生发展过程。但其确切的发病机制 尚未完全阐明。因此，食管癌治疗的主要研究方向依然是其发生发展过程 中细胞内信号传导通路的异常活化和新型抗肿瘤药物的靶点。 在异常的激活。mTO髓路被认为是蛋白质合成的主要信号调节通路，参 与细胞增殖、分化、迁移等调节。mTOR是一种多功能激酶，参与许多重 的4EBPl与elF4E的亲和力下降并与之解离，促进翻译起始复合物形成， 磷酸化，并与elF4E结合从而抑制翻译过程起始并诱导细胞凋亡。 从而揭示食管癌的发生、发展机制，并为食管癌的治疗提供新的思路。 目的：探讨Bufalin对人食管癌细胞4EBPI活化及凋亡的影响。 方法： 中，使用Western 时间。 2用WesternBlot方法分别检测不同处理组(对照组、空载体转染组、 wtmTOR质粒后Bufalin对食管癌mTOR通路的影响。 中文摘要 3用RT-PCR方法分别检测不同处理组(对照组、空载体转染组、 的表达。 4采用免疫细胞化学方法检测不同处理组(对照组、空载体转染组、 内Bad和Bcl．2蛋白表达的变化。 结果： 1 别，差异不具有统计学意义(尸O．05)。 2成功将wtmTOR质粒扩增并转染到食管癌细胞中，并检测到其下游 异具有统计学意义。 3Western 2 中文摘要 (0．655+0．01 1)和 4免疫细胞化学法结果显示：Bcl．2和Bad蛋白主要表达于食管癌细 胞Ecal09的细胞浆或细胞膜，为棕黄色，在高倍镜下观察呈颗粒状，结 果显示转染wtmTOR质粒组Bad阳性表达率为16．53％，明显低于对照组 结论： 1 株的生长。 2 Ecal09细胞株的凋亡。 Blot； RT．PCR；免疫细胞化学；凋亡 3 英文摘要 4EBPlandcell theactivationof