甘蓝型油菜人工合成种及其杂交种亲本遗传多样性评价和的分析.pdf

甘蓝型油菜人工合成种及杂交种亲本遗传多样性评价与研究 摘要 杂种优势利用是提高油菜产量、选育优质高抗品种的主要途径。亲本间的遗f 差异则是产生杂种优势的遗传基础。然而，甘蓝型油菜起源发生较晚，其种质资# 的遗传基础远不及白菜型油菜等芸苔属其它种，我国的甘蓝型油菜系由欧洲和日2 引进，种质资源显得更为匮乏。这严重制约了我国油菜育种工作的进一步发展。 自1935年日本学者Nagahara阐明甘蓝型油菜是由白菜型油菜与甘蓝天然杂； 并二倍化后进化而来以来，各国学者开始了利用白菜与甘蓝人工合成甘蓝型油菜自 研究。与甘蓝型油菜不同，自菜型油菜与甘蓝均具有十分丰富的遗传变异，我国宴 是白菜型油菜的起源中心之一。因而，开展对甘蓝型油菜人工合成种的利用研究名 油菜育种中是一项很重要且必要的工作。 本研究利用RAPD和SSR技术对本课题育成的甘蓝型油菜杂交种亲本种质资源逆 行遗传多样性评估：同时，对自己合成及德国引进的甘蓝型油菜人工合成种的种月 资源也进行分子标记遗传多样性评估，利用系统进化树分析软件构建人工合成种ss 标记进化树，并根据种质资源评估和进化树分析结果，提出利用人工合成种拓展t 蓝型油菜及杂交种亲本种质资源的方法；对上述人工合成种种质资源的部分有利_耳； 价值的性状进行了考察，对具有波里马细胞质雄性不育(polCMS)恢复基因／?fp群 人工合成种进行恢复基因等位性鉴定，并筛选与Mp连锁的分子标记。此外，还殪 AFLP技术进行了改进。主要研究结果如下： 1．甘蓝型油莱杂交种亲本种质资源分子标记评价 RAPD、SSR和ISSR聚类结果均表明，大部分甘蓝型油菜杂交种亲本均聚在一 个大的类中，杂交种亲本种质资源的遗传基础狭窄，不育系的种质资源比恢复系敲 种质资源的遗传基础更狭窄。同时，采用轮回选择方法育成亲本的遗传变异大于青 规杂交或回交方法育成亲本的遗传变异，2份人工合成种对照品系与甘蓝型油菜杂 交种亲本的遗传距离很大。通过轮回选择育种方法可以有效利用现有甘蓝型油菜醣 种质资源，丽将人工合成种特异种质导入甘蓝型油菜则可从根本上解决现有甘蓝型 油菜种质资源匮乏的现状。 2．甘蓝型油菜人工合成种种质资源的评价与利用 对人工合成种脂肪酸组成、自交不亲和性、抗(耐)菌核病性等性状进行分析 与鉴定，获得具有高油酸、高亚油酸、高芥酸、低亚麻酸含量等品质性状的材料， 自交不亲和品系，抗(耐)菌核病品系，无蜡质品系以及核不育品系等特殊材料。 CMS不育系。创建了一个用于长期改良目的的 不断回交获得不育性彻底的15个pol 人工合成种轮回选择群体。 华中农业大学2004届博=匕论文 在RAPD和SSR聚类中，大部分甘蓝型油菜对照品种集中分布于一个大类中， 甘蓝型油菜品种(系)的遗传基础较窄。国外甘蓝型油菜品种(系)遗传多样性比 国内甘蓝型油菜品种(系)丰富，冬性品种、半冬性品种和春性品种在遗传多样性 丰富程度的表现为冬性品种春性品种半冬性品种。98份人工合成种则分布于其 它类，其遗传多样性远大于甘蓝型油菜对照品种的遗传多样性。 主成分分析表明人工合成种与甘蓝型油菜品种(系)有显著的差别，两者各为一‘ 类，有少数交叉，表明甘蓝型油菜可能由少数白菜型油菜与甘蓝天然杂交并二倍化 更准确、可靠。 在SSR进化树上，46份甘蓝型油菜品种(系)中有43份处于进化树的同一分 枝上，该分枝又分化为两个分枝，其中2l份中国甘蓝型油菜品种、2份德国甘蓝型 油菜品种以及全部3份日本甘蓝型油菜品种位于第一个分枝，其余17份国外甘蓝型 油菜品种以及3份人工合成种位于第二个分枝，且第二分枝的相对进化时间比第一 分枝的相对进化时间要早，符合甘蓝型油菜首先起源于欧洲然后传入亚洲的历史。 有6份人工合成种与甘蓝型油菜品种(系)在进化树上位于同一分枝，1份与 甘蓝型油菜品种(系)在进化树上位于相邻近的分枝，其余91份人工合成种在进化 树上与甘蓝型油菜品种(系)相距较远。 探讨了加快甘蓝型油菜人工合成种在油菜育种中利用的不同方法。 3．甘蓝型油菜polCMS育性恢复基因的分子标记 用RAPD、SSR和AFLP技术筛选到与polCMS育性恢复基因Rfp连锁的2个 最近，为4．3cM。 对Ad7LP技术进行改进，采用EcoRI+Psfl两种低频酶酶切组合。具有以下特点： 在150．800bp之间：条带信号强度大，对显影技术要求较低；低频酶