棉花分子标记遗传连锁图构建与产量、纤维品质相关性状定位.pdf

中文摘要 棉花是世界上重要的经济作物，棉花纤维是纺织工业的重要原料，在国民经济 中占有重要的战略地位。在棉花工作者的不断努力下，棉花产量大幅度提高，其它 性状如品质、抗病性、抗虫性也得到了很大的改善。然而，随着纺织工业的飞速发 展，棉花品种改良的速度落后于纺织技术的发展，尤其是纤维品质的提高远不能满 足纺织工业的技术要求。培育高产、优质的棉花品种是当务之急，但是，由于产量 与纤维品质性状呈负相关，传统育种很难同时对产量与纤维品质性状进行改良。分 子标记的出现以及分子数量遗传学的兴起，可以将数量性状分解成单个盂德尔因子 进行详细剖析，从而更加细致地了解数量性状的遗传规律，将优良性状进行有目的 地组合。本研究在构建分子遗传连锁图的基础上，对产量、品质性状进行QTL分析， 所得结果如下： 1．SRAP分子标记在棉花遗传研究中的应用 SP,AP(Sequence．relatedAmplified frames)进行扩增。该标记具 记系统，通过独特的引物设计对ORFs(openreading 有简便、稳定、中等产率、可产生共显性标记、便于克隆测序目标片段的特点。自 创立以来，SRAP标记已被应用于图谱构建、比较基因组学、遗传多样性分析和基 因定位的研究。 本研究将SRAP标记应用于棉花的遗传研究，并建立了完整的PCR反应体系， 此体系稳定可靠、扩增效果好、可重复性强。 本之间表现出很强的多态性，每个引物组合可产生50个左右清晰可辨的条带。选取 多态性好的76个引物组合进行群体分析，共得到285条多态性条带，每组合的多念 性条带数从l～13不等。平均每个引物组合产生3．75个多态性条带。对得到的285 个多态性标记进行连锁分析，构建遗传连锁图。237个标记进入39个连锁群 有2～13个标记，最长的连锁群为2274cM，最短的连锁群为5cM。标记间最大间 分布比较均匀，没有标记聚集在一起的现象。这是首张用SRAP标记构建的棉花分 子遗传连锁图谱。 物(1555％)对在两个亲本之间表现多态性。共得到48个位点，平均每个引物组 合产生1．30个位点，单个引物组合最多产生3个位点。SRAP标记的多态性比率比 ． SSR和RAPD高。 以上研究结果表明，SRAP标记可在棉花分子生物学领域中广泛应用。 2．海岛棉、陆地棉种间遗传连锁图的构建以及纤维品质性状的分子定位 陆地棉和海岛棉是两个主要的异源四倍体栽培种，分别贡献了棉花世界产量的 90％和5％左右。陆地棉的特点是产量高，纤维品质性状表现一般；海岛棉则纤维 品质优良，而产量较低，通过对二者杂交后代的选择，可能得到产量高、品质优良 的个体。为了更好地了解棉花纤维品质性状的遗传规律，应用SRAP，SSR和RAPD 三种标记构建四倍体栽培棉花的分子遗传连锁图，作图群体为邯郸208xpima90杂交 个(50．8％)多态性较好的引物组合对F2群体进行分析，共产生437个多态性位点， 每个引物组合产生l～13个多态性位点，平均每个组合产生3．61个多态性位点。对 个连锁群分配到相应的染色体上。对所有位点进行#测验以检验其分离情况，135 个偏分离标记进入连锁图，分布在34个连锁群上，并倾向于聚集在连锁群末端。 用此连锁图对棉花纤维性状进行QTL分析，应用复合区间作图法共检测到13 的表型变异。13个QTLs中，6个定位在纤维供体的A亚组，6个位于不产生可纺 6 和马克隆值。 3．陆地棉种内遗传连锁图的构建及产量、纤维相关性状的QTL定位 由于育种中应用的多是种内的多样性，构建与目标性状相关联的连锁图可以有 效地提高育种效率。以冀棉5号为父本，DH962为母本，构建陆地棉种内F2分离群 体。DH962是瑟伯氏棉(Gthurberi)的商代导入系，其突出表现为纤维品质优良。 通过构建陆地棉种内的遗传连锁图对棉花产量、纤维性状进行QTL定位。 引物组合(15．55％)在两亲本之间表现多态性。将这143个多态性引物检测F2群体， 位点。每个SRAP引物组合平均产生1．30个位点，单个引物组合最多产生了3个位 点。 对156个位点进行连锁分析，构建连锁群。139个位点包括79个SSR位点，15 1018．5cM，大约覆盖棉花基因组的21．86％，标记间平均间距为7．33cM。 7个为显性标记，3个为共显