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久效磷对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)多种毒性效应的当量评价 久效磷对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans) 多种毒性效应的当量评价 摘要 致死率是评价外源化合物对生物体毒性的最重要指标。然而，环境中外源化 合物的浓度普遍较低，往往无法导致生物体死亡。越来越多的研究表明，亚致死 剂量外源化合物能对生物体产生多种毒性效应，危害生物体健康。通常情况下， 这些多种毒性效应是同时存在的，而每一种毒性效应当量又各不相同，它们既相 互联系又有主次之分，因此对生物体产生的危害程度也各不相同。如何快速确定 外源化合物多种毒性中的主要毒性，如何从外源化合物多种毒性评价指标中快速 筛选出能够反映其主要毒性效应的生物标志物，就成为外源化合物毒理学评价中 的首要问题，而主要毒性的确定也将为一种未知外源化合物毒性生物检测提供科 学依据。 久效磷(MCP)是一种广谱类内吸附性有机磷农药(OPs)，其毒性作用主要是通 过抑制生物体内乙酰胆碱酯酶(ACHE)的活性，影响乙酰胆碱(ACh)正常代谢产生 神经毒性。此外，久效磷还具有细胞毒性、遗传毒性、生殖毒性、发育毒性和环 境雌激素效应。久效磷的多种毒性效应间存在何种关联，哪种毒性效应对生物体 危害最大，逐渐引起了我们的关注。为了解决这些问题，本文选取秀丽隐杆线虫 (Caenorhabditiselegans)为实验动物，研究了久效磷对秀丽隐杆线虫的多种毒性 效应，通过相关性分析和主成分分析进行当量评价，确定多种毒性效应间的相互 关系和主要毒性效应。 本文以体长和怀卵数为指标分别研究了久效磷的发育毒性和生殖毒性，以乙 酰胆碱酯酶活性和行为为指标研究了久效磷的神经毒性，以多种胁迫相关基因表 达为指标研究久效磷的环境雌激素效应、细胞毒性、发育毒性和神经毒性，然后 通过相关性分析和主成分分析对久效磷的生殖毒性、发育毒性、神经毒性、细胞 毒性和环境雌激素效应进行当量评价。 研究结果表明： h后，秀丽隐杆线虫体长、怀卵数 (1)O．5、5．0和50．0mg·L．1久效磷暴露24 和乙酰胆碱酯酶活性均受到显著抑制，且具有剂量效应关系，表明久效磷具有发 久效磷对秀丽隐杆线虫(C缸疗砷口6幽话e^瑁n凇)多种毒性效应的当量评价 育毒性、生殖毒性和神经毒性效应。 h后，各暴露组秀丽隐杆线虫头部 (2)O．5、5．0和50．0nag·L-1久效磷暴露24 摆动和身体弯曲频率均极显著降低，0．5nag·Ld暴露组秀丽隐杆线虫向前摆动次 数显著减少，5．0和50．0 nag·Ld极显著减少，5．0和50．0nag·L．1暴露组秀丽隐杆 线虫在NaCl存在和缺少食物条件下，对NaCI的趋向性极显著升高，50．0 nag·Ld h h均显著降低，在24 暴露组秀丽隐杆线虫菌落接触率与对照组相比在2，4，6，8 极显著降低。结果表明久效磷能够导致秀丽隐杆线虫运动、学习和觅食行为的严 重缺陷，表现出神经毒性效应。 (3)0．5、5．0和50．0 h后，采用实时荧光定量PCR方法 nag·Ld久效磷暴露24 检测了多种胁迫相关基因表达水平，结果发现久效磷暴露能够导致hsp．16．41、 雌激素效应、细胞毒性、发育毒性和神经毒性。 (4)相关性分析表明，25种久效磷毒性评价指标中192对指标间存在显著相 关性，证明了久效磷可以同时产生多种毒性效应且相互关联；主成