以半乳糖残基为体的Combretastatin A4靶向药物的合成及抗肿瘤研究.pdf

中文摘要 中文摘要 CombretastatinA4，是一种从非洲灌木(Combretum caffrum)中分离得到的 具有抗肿瘤活性的天然产物，为秋水仙碱类似物，并且在抑制微管蛋白活性方 面显示出比秋水仙碱更高的活性。自从发现CombrctastatinA4能够诱导实体瘤 血管发生不可逆抑制后，它迅速成为抗癌领域研究的热点化合物。然而由于它 本身固有的水溶性差、易变构、生物利用率低等缺点，妨碍了它成为一个临床 CA-IP已经进入临床研究阶段。特别是CA．4P在欧美国家已经作为一个肿瘤血 管抑制剂进入Ⅲ期临床试验。 为了克服其结构不稳定、水溶性差等缺点，在对其构效关系分析的基础上， 我们利用3，4，5．三甲氧基苯乙酸和异香兰素通过两步合成了顺式的 Combretastatin A4：在对其修饰的过程中，保留了对抗肿瘤活性有重要作用的三 甲氧苯环基团(A环)和B环4．OCH3，在B环的3位位置上进行了用多效价 半乳糖基取代原有的羟基的修饰研究。利用半乳糖残基作为药物引导物是因为 在肝细胞表面存在的去唾液酸蛋白受体能特异性识别半乳糖残基或N．乙酰半 乳糖胺，并且结合能力与寡糖残基数目和排列次序有关，我们设计出多效价的 半乳糖糖基化CombretastatinA4，使其能和去唾液酸蛋白受体结合更紧密、靶 向性更强、能定向运输到肝细胞中发挥效果，改善抗肿瘤药物在身体内的分布， 减少对正常器官的损害，提高疗效和减少药物给剂量。 A4在内 根据这一设计思想，本文一共设计并合成出了包括Combretastatin 半乳糖、甘露糖和木糖对CombretastatinA4修饰所得；二糖基化Combretastatin A4和纤维二糖基化CombretastatinA4作 接着再分别以乳糖基化Combretastatin 为母核合成了四糖基化Combmtastatin A4衍生物4个。 利用MTT法，用A549肺癌细胞株、HepG2肝癌细胞株对所合成的16个 以半乳糖残基为载体的CombretastatinA-4靶向药物的合成及抗肿瘤研究 化合物进行了体外抗肿瘤活性及构效关系的初步研究。实验表明，在被亲水性 的糖修饰以后，抗肿瘤化合物CombretastatinA4的细胞毒性显著降低；在单糖 A4， 基化的CombretastatinA4中，细胞毒性最高的是木糖基化Combretastatin A4 我们推测是因为木糖为五碳糖，极性比其他几个单糖小，对Combretastatin 细胞毒性的影响也比其他几个单糖小，所以活性最高。随后的半乳糖残基可以 特异性结合去唾液酸蛋白受体，所以较剩下的两个单糖的细胞毒性大；在二糖 基化CombretastatinA4中，乳糖基化的CombretastatinA4没有显示理想的细胞 毒性，我们推测是因为半乳糖残基的数目太少和去唾液酸蛋白受体结合力太弱 的原因导致的；四糖基化CombretastatinA4中，具有乳糖母核和两个半乳糖残 基的9号化合物表现出了显著的细胞毒性与靶向性，并且通过该组数据的对比 可以得到这样一个结论：糖基化CombretastatinA4的细胞毒性，不只是与暴露 在最外面的半乳糖残基有关，也和母核的糖基的种类有关；六糖基化 Combretastatin A4的四个化合物细胞毒性都很相近，没有明显的大小之分，我 们认为可能与CombretastatinA4的释放速度有关，即靶向药物的选择性治疗效 果，依赖于两个方面，首先，具备高度的靶向性，其次，能够快速的释放，有 利于形成足够的药物浓度，从而抑制肿瘤细胞。这一点仅是我们的理论推测， 也是我们下一步的重要工作内容，即从机理上进一步阐明糖基化Combretastatin A4抑制肝癌细胞的作用机制。 关键词：Combretastati