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大豆GmcpScA基因克隆及表达特异性研究.pdf
摘要
摘要
See途径是将核编码的叶绿体蛋白输入到类囊体腔的蛋白分选途径之一,
对叶绿体正确行使其功能有重要作用。前期研究获得了拟南芥AtcpSecA基因功
能缺失的突变体agyl,其叶片呈黄白色,叶绿体发育缺陷,内部缺少类囊体片
层结构。我们从大豆中克隆了拟南芥AtcpSecA的同源基因GmcpSecA基因的全
长cDNA序列和5’端ATG上游1.5
kb的启动子:同时构建了GmcpSecA::GUS
和CaMV
35S::GmcpSecA融合基因的双元表达载体,以农杆菌介导的转化方法
获得转基因拟南芥。GUS组织化学染色结果表明:在GmcpSecA::GUS转基因
拟南芥的子叶、叶片、萼片等绿色组织中都可以检测到较强的GUS活性,而在
非绿色组织中没有检测到GUS表达。
以双元表达载体CaMV
35S::GmcpSecA转化拟南芥叶绿体结构与功能缺失
GmcpSecA基因与AtcpSecA基因功能相似,在叶绿体发育过程中发挥重要作用。
以双元表达载体CaMV35S::GmcpSecA转化野生型拟南芥,通过表型分析发现,
与野生型拟南芥相比,CaMV
35S::GmcpSecA转基因拟南芥生长更加旺盛,莲
座较大,叶片绿色较深,抽薹较早,以及对光敏感性增加。
关键词:大豆GmcpSecA基因表达特异性功能回补叶绿体发育
Abstract
Abstract
The isessentialfor into
See-dependentproteinsortingpathway proteinimport
functionthe
the lumenandis forthe of
thylakoid importantproper chloroplast.We
have thecharacterizationofaloss-of-functionmutantof
previously epSecA,
reported
mutantalbino
theATPasesubunitoftheSec is
proteincomplex.Thehomozygous
and lacksthe structure.Weclonedthe
lethal,and full·length
seedling thylakoid
eDNAof andits1.5kb ofthe
sequenceupstreamcodingregion
GmcpSecA promoter
from examinedthe of RT-PCRin
soybean,and expressionpatternsGmcpSecAby
this constructed and fusion
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