大豆GmNF-C1,2,3基因的克隆与功能分析.pdf

河南农业大学硕士论文 大豆G珊ⅣFyC，。2，3基因的克隆与功能分析 摘 要 Factor 在植物中，NF．Y(NuclearY)家族转录因子参与调节多种生理生化过程，诸 如胚胎发育、蓝光信号转导、干旱胁迫、光周期开花、内质网应激反应、ABA(abscisicacid) 的传输、固氮根瘤的发育、光合作用和根的延伸等等。但是，对大豆的NF．YC家族基因的 研究，尚属空白。 本研究根据拟南芥NF-YC基因家族蛋白序列和大豆基因蛋白序列比对分析，预测到了 15个大豆G聊ⅣF．yo基因，他们分属于9条染色体上。根据已发表的大豆基因组序列，我 们从大豆“垦农18”的cDNA中克隆到了3个ⅣByC基因，分别命名为G坍ⅣFyC，，2，3。 生物信息学分析表明：它含有DNA结合域、与NF．YA和NF—YB的相互作用区域以及CCAAT 结合域，这些功能域与拟南芥等植物中的同源基因NF．YC3，4，9高度保守，表明GmMLycJ， 2，3基因可能具有与拟南芥的彳删FyCt3，彳，9的类似功能相似，可能参与光周期开花调控。 realtime 利用实时定量PCR(quantitativeRT-PCRqPCR)对它们时空表达进行了监测。 结果显示，GmⅣFy∞在长日照和短日照下均表现出明显的节律性，G坍ⅣF心在长日照 下表现出一定的节律性，而GmⅣFyC，转录水平表达不受光周期及生物钟的调控。生长发 育时期及不同组织器官中，G柳ⅣF-yC，，2，3具有类似的时空表达模式，并都在特定的组织 有较高表达，其表达主要集中在叶片中并且最高表达量出现在开花期。 在拟南芥原生质体瞬时表达体系中证实，GmNF．YCl，2蛋白可能定位于细胞核内， GmNF．YC3在细胞核和细胞质中可能均有分布。 酵母双杂交实验证GmNF—YC 有部分相互作用现象。 本文结果为进一步研究大豆NF．YC家族基因的功能和大豆分子育种提供了重要的依据。 关键词：NF．Y转录因子；开花；CO!胚剐^强光周期；大豆 河南农业大学硕士论文 大豆G册MeJ，C，，Z3基因的克隆与功能分析 英文摘要 andFunctionalof Genein 6切面Vp】旧，Z3 Soybean Cloning Analysis max) (Glycine Xinjian Supervisor：Pro￡Chen Candidate：Cao、ran Master AbstractThenuclearf．amor actonthe ofother promoters Y(NF—Y)妙pically tomodulate the haVeroIes regulato巧f．actors geneexpressions．Inpl柚ts，NF-Y dependent signaling，drou曲tresiStance，photoperiod inemb巧ogenesis，bluelight reticulum(ER)stress，abscisic nowering，endoplasmic nodule roo