大豆根瘤菌与促菌复合系筛选及机理研究.pdf

摘 要 植物根际促生细菌(PGPR)是一类生存在植物根圈范围中，能通过分泌植物激素等方法促 进植物生长，或对病原菌有拮抗作用的有益的细菌，在农业上具有应用价值。许多研究表明，PGPR 能够在共接种豆科植物中促进结瘤，包括增加瘤数、促进根系发育等。将大豆根瘤菌与其它有益 微生物复合。促进大豆根瘤菌的结瘤固氮作用，已成为大豆根瘤菌剂应用研究的重要内容。本文 从大豆根际分离的PGPR及本室保藏菌株中，筛选促生菌，与大豆根瘤菌进行双接种。采用蛭石 和土壤盆栽试验，筛选出5株对大豆根瘤菌结瘤能力具有促进作用的促生菌，获得了大豆根瘤菌 ．促生菌的优良组合，并对其机理进行了研究，主要结果如下： 通过溶磷能力和产生长素的定性测定，从供试的73个菌株中共筛选到具有溶磷能力的菌株 24株和产生长素的菌株13株。其中，有9株促生菌同时具有溶磷及分泌生长素的能力。 选择14株促生菌与广谱性的快生大豆根瘤菌4644和慢生大豆根瘤菌4219进行蛭石盆栽接 种试验，得到5个优良双接种组合，分别为快生大豆根瘤菌4644与枯草芽孢杆菌1．15、促生菌 种在根瘤数目、根瘤干重、植株地上千重和植株含氮量方面均有提高，能够较好地促进大豆的结 瘤和生长。以阜阳、延安和济宁三种土壤进行盆栽双接种复筛实验，结果与蛭石盆栽基本一致。 但在不同地区的土壤中，5个共接种组合对各项指标的增幅数值有所不同。 溶磷能力的定量测定结果表明，5株促生菌均有溶无机磷能力，其中枯草芽孢杆菌1．15和促 株的全磷含量测定，双接种使得植株含磷量提高至少10％以上，最高达到62．5％。 高效液相色谱法测定促生菌发酵液的成分，结果显示5株促生菌具有产生植物激素和有机酸 的能力。5个促生菌都有产生长素的能力。除促生菌l一3外，其余菌株不产生玉米素。 Phyllobacteriumi咖qiyense、Sinorhizobium sp．)、中华根瘤菌属(Sinorhizobiumsp．)和芽孢杆菌属(Bacillussp．)。 杆菌属(Phyllobacterium 用蛋白质组学技术研究促生菌提高大豆根瘤菌结瘤同氮能力的分子机理。筛选所得的促生菌 过双向电泳和质谱分析确定其产生的蛋白响应，发现22个上调蛋白，4个下调蛋白，涉及糖代谢 相关蛋白及大量假设蛋白。用荧光假单胞菌10040的发酵液和中黄13大豆苷元处理菌株4644， 发现60个上调蛋白，14个下调蛋白，涉及代谢相关蛋白、DNA复制转录相关蛋白和p内酰胺酶 类。其余表现出差异的蛋白大部分在数据库中检索不到匹配信息。 关键词：大豆根瘤菌，植物根际促生菌(PGPR)，筛选，溶磷细菌，生长素(IAA)，双接种， 蛋白组学 Abstract aclassofbacteriasurvivedinthe of Plant rhizobacteria(PGPR)are rangeplant growthpromoting callsecret hormoneorinhibit studiesshowedthat bacteria，Many plant pathogenic rhizosphere，which PGPRcan thenumberof root nodulation，includingincreasing nodules，promoting promote andSOon．This that PGPRfrom soilandthe development paperreportedscreening soybeanrhizosphere rhizobium