大鼠肝再生与非精性脂肪肝发生的基因转录谱相关性及其意义研究.pdfVIP

}IIIlllIl Y1 960800 摘 要 目前，人们对于非酒精性脂肪肝病的发病机制的阐述，尚以“二次打击”学说为主。 为从基因转录水平探索大鼠肝脏细胞基因表达变化与大鼠非酒精性脂肪肝发生的相关 性、大鼠肝再生与大鼠非酒精性脂肪肝发生的异同和JNK、ERKl／2信号通路在大鼠肝 再生与大鼠非酒精性脂肪肝发生中的作用异同，本文用高fJ旨-％剂、通过强饲灌胃方法建 Genome230 立大鼠非酒精性脂肪肝模型，用大鼠全基因组基因表达谱芯片Rat 2．0检测 了建模第2、4、6周时肝组织(细胞)的基因表达谱，检测了非酒精性脂肪肝大鼠与部 分肝切除大鼠肝组织的基因表达谱，检测了JNK和ERKl／2信号通路相关基因在大鼠非 酒精性脂肪肝和大鼠肝再生中的表达变化，用定量PCR确证了上述芯片检测结果的可 靠性，并用生物信息学和系统生物学等方法对上述芯片结果进行了分析。定量PCR结 果与芯片检测结果一致，表明芯片检测结果可靠，可以使用。用生物信息学和系统生物 学等方法分析肝脏细胞基因表达谱与非酒精性脂肪肝发生的相关性表明，93个基因与大 鼠非酒精性脂肪肝发生相关，涉及刺激反应、炎症反应、信号转导、转录因子、物质运 输、糖类代谢、脂类代谢、氨基酸代谢、蛋白代谢、能量代谢、细胞增殖、生长、分化、 发育、建成、凋亡、迁移、粘附等18种生理活动，其中，在整个非酒精性脂肪肝发生 过程中，细胞分化、发育等活动减弱，发生第2周，肝脏的炎症反应减弱，TACl和XCLl ELOVL3等发挥重要作用。用生物信息学和系统生物学等方法分析大鼠再生肝与非酒精 性脂肪肝的肝组织基因表达谱的相关性，结果表明，非酒精性脂肪肝发生和肝再生的生 理活动不显示时间相关性，且非酒精性脂肪肝发生中脂类和糖类代谢强于肝再生，炎症、 免疫反应、细胞粘附和迁移、细胞增殖和分化等生理活动弱于肝再生。用生物信息学和 系统生物学等方法分析JNK、ERKl／2信号通路相关基因在大鼠非酒精性脂肪肝发生和 肝再生基因表达谱中的表达变化及所预示的生理活动，结果表明，JNK信号通路涉及 Genome230 42条途径和302个基因，其中，有75个基因在Rat 2．0芯片中发生了有意 义表达变化，涉及肝再生的64个基因，非酒精性脂肪肝发生的21个基因，37条途径参 与调控大鼠肝再生的细胞增殖和凋亡，对大鼠非酒精性脂肪肝发生的调控作用则不显 Genome 著；ERKl／2信号通路涉及14条途径和165个基因，其中，有47个基因在Rat 230 2．0芯片中发生了有意义表达变化，涉及肝再生的42个基因，非酒精性脂肪肝发生 的11个基因，6条途径参与大鼠肝再生和非酒精性脂肪肝发生的细胞增殖调控。 Genome230 关键词：大鼠非酒精性脂肪肝；大鼠肝再生；Rat 2．0芯片；JNK信号通路； ERKl／2信号通路 II ABSTRACT At viewonthe ofnon-alcoholicliverdisease widelyaccepted pathogenesis fatty present，the thatNAFLD asa ofa”two-hit wasto the (NAFLD)is dev