应用MALDITOF MS技术检测及鉴定常见益生菌的研究.pdf

中文摘要 !I‘一一一一一————————皇曼——曼—曼—————曼———一曼II曼曼曼曼皇曼曼璺 中文摘要 作为益生菌产业中的重要研究内容，针对益生菌候选菌株筛选及鉴定方法的 研究一直受到研究者们的关注。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法是近 年发展起来的，基于菌株特征性蛋白指纹图谱实现菌株鉴定的新型微生物鉴定方 法，其方法除具有鉴定准确、快速等优点外，还具备可高通量鉴定被检菌株等特 点，其方法的适用性及实用性正被研究者们广泛而深入的研究。 本文通过对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法检测及鉴定常见益 生菌过程中不同的分析方式、不同的基质、不同的基质溶剂、不同的菌体处理溶 剂、不同的点样方式及不同的点样比例等主要影响因素进行考察，首次建立了基 质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法检测及鉴定常见益生菌的最佳实验方 法。另外，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法所得鉴定结果被证明具有 较高的稳定性及较好的重复性且当菌落总数在104cfu以上时被检菌株均能够被 正确地鉴定到种水平。 ‘ 。 此外，以传统表型鉴定方法及16SrDNA序列同源性分析鉴定方法为对比方 法，对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法检测及鉴定常见益生菌的实用 性进行考察发现，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法具备对常见益生菌 在属、种、亚种及菌株水平上进行鉴定的能力且此方法鉴定准确、快速、操作简 易、廉价、可对被检菌株进行高通量鉴定，展现出了此方法良好的应用前景。 rDNA 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析法；传统表型鉴定；16S 序列同源性分析；菌种鉴定；益生菌； Abstract Abstract The and methodsofthe screeningidentifying candidate an probioticstrains，as researchof important part probiotic been concerns industry,hasgreat paid by researchers．Inrecent laser years，Matrix-assistedionizationtime desorption of mass Was toscreenand flight spectrometry,which strainsbasedon applied identify of proteinfingerprintsstrains，is researchedbecauseofitscharacteristics widely of and accuracy,rapidity high—throughput． Inthis of research，the