拟南芥耐硒基因SE1的克隆及功能研究.pdfVIP

拟南芥耐硒基因VSEl的克隆及功能研究 摘 要 在主要农作物中定位表达硒代谢关键酶基因来调节农产品含硒水平，满足人类健 康摄硒的需要，具有重要理论与实践价值。利用分子生物学手段分离耐硒基因，再 利用转基因技术培育出更多的耐硒植物是未来的发展趋势。 正向遗传学是指，通过生物个体或细胞的基因组的自发突变或人工诱变， 寻找相关的表型或性状改变，然后从这些特定性状变化的个体或细胞中找到对 应的突变基因，并揭示其功能。本文从化学诱导型激活标签子系统构建的突变 体库中筛选到功能获得型耐硒突变体vsel，初步鉴定对一定浓度的硒盐(亚硒 酸钠)具有耐受性，而在正常生长条件下与野生型生长发育没有明显差异，在 Na2Se03和10pMp．estradiol+5mg／L 的耐硒性状。遗传分析反应，调控vsel突变体耐硒性状的基因以隐性单基因的 突变体对硒耐受的途径可能与抗氧化系统有关。 因编码一个胞质型抗坏血酸过氧化物酶(eAPX)，APX是植物体内的重要酶系， oleracea)有较高 列比对分析显示，VSEl基因编码的蛋白质与甘蓝(Brassica 的相似性。 3、通过对VSEl基因表达模式分析发现，VSEl基因在突变体中被敲除，在各 组织中表达水平具有差异性，在果荚中的表达量最高，而在莲座叶中的表达量 最低。组织中硒含量测定发现，vseI突变体根中硒含量显著高于WT。分析AtGPX、 BSO+5mg／L 因敲除对硒胁迫耐受可能与抗氧化系统有关。以上研究结果表明VSEl基因通过 关键词：拟南芥，硒耐受性，VSEl基因 4 Cloneandfunctionalof analysis gene Abstract To locateand seleniummetabolic inmain to express keyenzymegene crops seleniumlevelofthe tomeettheneedofhumanhealth adjust agriculturalproducts seleniumhas theoreticaland molecular ingestion important practicalvalue．using meansto seleniumresistanceand biology separate genes to transgenictechnology cultivatemoreselenium resistantiS trendofinthefuture． plantsdevelopment Forward mutationorartificialmutationtothe genetics，throughspontaneous ofindividual orcellsto for genome lookrelevant ortrait organisms phenotype