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心脏酶 corin 在高血压发病机制中的作用 中文摘要 心脏酶 corin 在高血压发病机制中的作用 中文摘要 第一部分 高血压患者血浆可溶性 corin 检测与 CORIN 基因分析 目的： Corin 是在心肌细胞中发现的一种Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶，其主要功能是将心房 利钠肽前体（pro-atrial natriuretic peptide ，pro-ANP ）转化为有活性的心钠肽（ANP ）， 从而调节心脏功能和血压。锚定在细胞膜上的 corin 可被 ADAM10 （a disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10 ）及corin 自我切割，生成~180 、~160 和~100 kDa 的可溶性片段。故血浆及细胞培养上清中可检测到可溶性corin，且血浆 中可溶性corin 水平与心功能及肾功能相关。 Corin 在血压调节中发挥重要作用，Corin 基因敲除小鼠会发生高血压及妊娠高血 压。在人类也发现与高血压及妊娠高血压发生相关的 CORIN 基因突变。但迄今，高 血压患者血浆中的 corin 水平国内外尚未见报道，也未见高血压人群中大样本分析 CORIN 基因变异的研究。本研究中，我们将检测高血压患者血浆中可溶性 corin 水平， 并对高血压患者 CORIN 基因进行测序分析，发现 CORIN 基因突变和单核苷酸多态性 （single nucleotide polymorphism，SNP），并进一步研究 CORIN 基因变异对其分子机 构和功能的影响，从而了解 corin 在高血压病理过程中的作用及机制。 方法： 1. 采集正常人和高血压患者的血液样本，以 EDTA 为抗凝剂，离心后获得血浆 和血细胞，分别保存备用。 2. 利用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA ）方法 检测 480 例正常人和 594 例高血压患者血浆可溶性 corin 水平，对所得的数据进行统 计学分析。 3. 提取正常人和高血压患者血细胞中的基因组 DNA ，作为聚合酶链式反应 （polymerase chain reaction ，PCR ）的模板，扩增 CORIN 基因的 22 个外显子，对所 I 中文摘要 心脏酶 corin 在高血压发病机制中的作用 得 PCR 产物进行 DNA 测序。 4. 分析 CORIN 基因变异所导致的氨基酸改变在 corin 蛋白结构中的位置。 结果： 1. 我们对中国高血压患者和正常人群血浆可溶性 corin 水平进行了测定和比较 分析，发现高血压患者血浆可溶性 corin 水平显著低于正常人（0.6 ± 0.3 vs. 0.9 ± 0.4 ng/mL ，p ＜0.0001 ）。 2. 对高血压患者和正常人群分别进行了男性和女性的分组比较。发现在正常人 中，男性血浆可溶性 corin 水平显著高于女性（0.9 ± 0.03 vs. 0.8 ± 0.03 ng/mL， p =0.005 ）；在高血压患者中，血浆可溶性corin 水平同样是男性高于女性（0.7 ± 0.01 vs. 0.6 ± 0.02 ng/mL，p =0.005 ）。由此可见血浆可溶性corin 水平与性别相关。 3. 对高血压患者和正常人群中男性与女性按年龄段进行分组比较时，发现同一 性别各年龄段之间的 corin 水平无显著差异。 4. 我们发现并定义了 insA （c.102_103insA ）、C13Y （131A→G ）、D95Y （376G →T ）、L334W （1094G→T ）和H525R （ 1667A→G ）等 CORIN 基因 S