心肌缺血大鼠颈交感神经节神经元P2X7受体介导电生理变化的研究.pdfVIP

摘要 摘要 研究背景和目的：心交感神经节后神经元位于颈上神经节(sco)或星状神经 的心绞痛症状，表明颈部交感神经参与心肌缺血伤害性传递。心肌缺血产生的 炎性介质包括三磷酸腺苷(ATP)和缓激肽等可兴奋心脏感觉传入神经并将信息 传递到大脑中枢，随后兴奋交感传出神经引起心率加快和血压升高等交感兴奋 受体参与心肌缺血信号传递。目前尚无颈部交感神经节P2X，受体参与心肌缺血 损伤性交感兴奋反射传递的文献报道，P2X7受体在心肌缺血引发的交感反射中 是否产生作用及可能机理尚不清楚。本实验拟通过观察心肌缺血大鼠颈上交感 神经节细胞介导的电生理变化、颈部交感神经节、心肌P2X，受体mRNA变化和 兴奋反射中的作用及可能机理，为心肌缺血损伤的防治寻找新的药物作用靶点。 方法：随机将实验大鼠分为生理盐水对照组、心肌缺血模型组、假手术组 降支建立心肌缺血动物模型，通过Real．timePCR方法观察以上各组大鼠颈上、 心肌缺血对P2X7受体激动剂在颈部交感神经细胞激活电流的影响，并了解P2X7 受体拮抗剂对此电流的作用。，(3)体外建立PCI2细胞“缺糖缺氧”模型，拟体内缺 血模型。用小干扰RNA技术特异性敲低“缺糖缺氧”培养条件下的PCI2神经细 胞的P2X，受体，合成的可抑制相关基因的一群小干扰RNA片段转染到培养的 神经细胞中，用Real—time 子浓度([Ca2+】i)峰值的变化。 PCR结果显示心肌缺血模型组大鼠颈上、星状交感神经 结果：(1)Real．time 摘要 片钳实验结果显示，心肌缺血大鼠颈部交感神经节细胞P2X7受体激动剂激活电 流明显高于对照组；P2X7受体拮抗剂呈剂量依赖性地抑制颈部交感神经节细胞 P2X7受体激动剂激活电流，且同一浓度P2X7受体拮抗剂对心肌缺血大鼠颈部交 感神经节细胞P2X7受体激动剂激活电流的抑制作用明显高于对照组；ATP．激活 电流的电流-电压关系曲线(I．V曲线)显示，心肌缺血组与对照组的电流翻转电 位值均在0mV左右。(3)小干扰RNA敲低实验结果显示缺糖缺氧组与缺糖缺氧 Lipofectamine2000试剂不会对P2X7受体表达水平造成影响；缺糖缺氧 定[Ca2+】i结果显示：1009M ATP可引起PCI2细胞[Ca2+】i增高，出现一个峰值； ATP引起的 氧+siRNA．P2X7组和缺糖缺氧+U0126组可以部分抑制1009M (pO．05，n-5)。1009M BzATP引起的 +siRNA．P2X7组和缺糖缺氧+U0126组可以明显抑制1009M (p0．05，n=5)。 结论：实验结果表明，心肌缺血后颈上、星状神经节和心肌的P2X，受体 变化。心肌缺血使P2X7受体激动剂在颈部交感神经细胞激活电流增大，P2X，受 体拮抗剂明显抑制增大的P2X7受体激动剂激活电流。缺糖缺氧状态下，P2X，受 增加。因此，颈上、星状神经节神经元细胞和心肌P2X7受体参与心肌缺血损伤 信息引发的交感兴奋反射传递，P2X7受体抑制剂可抑制交感兴奋反射传递，对 心肌缺血损伤产生保护作用。 关键词：颈上神经节；星状神经节；PCI2细胞；P2X7受体激动剂；P2X。 受体拮抗剂；全细胞膜片钳技术 Abstract ABSTRACT Backroundand neuronslocatein Objective：Cardiacsympatheticpostganglion cervical andstellate studiesfoundthatremoval superior ganglion ganglion．Clinical of cervi