拟南芥花药绒毡发育转录调控通路及关键基因TDF1功能研究.pdfVIP

摘 要 拟南芥绒毡层发育及功能相关转录因子的调控网络对成熟花药发育起到重 要的作用，因此，本课题基于之前对绒毡层发育调控通路的研究，进一步利用细 AMS 胞学、原位杂交的技术分析了绒毡层5个转录因子(DⅢTDFjMYBl03 MSI)的遗传关系，明确了其在调控网络中的上下游关系。此外，对R2R3．MYB 基因突变体转基因株系，并进行互补鉴定。其次，建立ChIP实验体系，预期利 用ChIP技术富集能被TDFI特异识别结合的下游基因。第三，基因芯片数据显 调，538个基因上调)，针对TDFI下调基因，通过多角度的生物信息学表达谱、 功能聚类与启动子的分析，预测若干TDFI直接调控的下游候选基因。同时，对 TDFI原核蛋白进行表达及复性，并通过酵母双杂交分析TDFI的转录功能域。 本课题实验结果将进一步的阐明了绒毡层特异转录因子的调控网络，同时也为解 释该转录调控网络对绒毡层发育与功能所起的作用提供重要线索。 关键词：拟南芥，花粉发育，绒毡层，转录因子，转录调控途径 ABSTRACT The networkof factorsin is forthe regulatory transcriptiontapetumimportant mature Ontheformer of pollendevelopment．Thus，basedanalysistapetalgenetic usesemi-thincrosssectionsandinsire tOshowthe pathway,we hybridizationgenetic with 5tapetal relationships transcription R2R3-MYB which tOthe factorhasbeen Additionally,TDFlbelongs transcription furtherstudiedforits the mutantlineswith function．First，constructtransgenic MYC／FLAGand the the identify tag complementary ChIP toenrichthe ofTDF finds system directlytargetgenes I．Third，Chipanalysis thattotal1790 are 252 and538 genes obviouslychanged(1down-regulated the flower atthe ofTDF up-regulated)intafl buds．Aimingdown-regulatedgenes l， we severalcandidatedownstream TDF1 with speculate genesdirectlyregulatedby Fluorescent