柑桔溃疡病菌(anthomonas axonopodis pv.citri)纤维素酶的分析.pdf

摘要 I， - -■ ● ● 义口以titomonas 1)v．cttrt axonovoats 纤维素酶的分析 微生物专业硕士研究生李永胜 指导教师胡军华副研究员 摘要 柑桔溃疡病(citrus monas axonopodis 最严重的病害之一，也是影响柑桔生产的重大检疫病害。纤维素酶是植物病原菌 引起病害重要的化学因子之一，主要是帮助病原菌侵入寄主、消解植物抗侵染机 械屏障、降解细胞内含物以供自己吸收利用。通过对Xac基因组及蛋白的生物信 息学分析发现其同样具有纤维素酶，推测Xac纤维素酶与侵染相关，是引起致病 症状的必要因子。通过对柑桔溃疡病菌纤维素酶的生物信息学的分析，获得纤维 素酶的等电点、分子量、信号肽、结构域和功能等特点。选取具有代表性的Xac 的酶进行了初步的机理分析。本研究主要结果如下： lXac纤维素酶共有22个纤维素酶，分成了11组，对其结构特点以及功能 纤维素酶具有GH5、GH8、GH9及GHl24个糖基水解酶家族模块，其中6组Xac 具有CelD 与Xac蛋白转运到植物细胞周质空间有密切联系，我们推测Xac纤维素酶很可能 与Xac侵染寄主相关。 Xanthomonas属均有同源蛋白。纤维素酶与Xanthomonas campestrispv．vesicatoria (Xcv)的纤维素酶同源性最高，所具有的功能性结构域的种类和个数都比较接近， 推测两者的纤维素酶在作用方式及病原菌在侵染寄主时所起的作用方面功能类 两南大学硕十学何论文 似。 3 为7．86，具有信号肽和GHl2模块，GHl2模块是其特有模块，推测在水解纤维 基因，经IPTG诱导后表达出了重组蛋白。 4利用天然底物和对硝基苯酚合成底物对Xaccel Barley 酶对硝基苯酚合成底物降解情况可知，Xaccell和Xaccel3为内切葡萄糖苷酶， 它们的主要的作用方式为随机地断裂各底物的B-1，4糖苷键，对相应的糖进行降 解。Xaccel5的内切葡萄糖苷酶活性不能确定，需进一步验证。 关键词：柑桔溃疡病菌；纤维素酶；生物信息学分析；克隆；表达 II Abstract oncellulaseofXan砌omonas Study ■● ●． ● DV．CZ们 axonopo订ZS Major：Microbiology 一 一- Candidate：Li Yongsheng 一 一 Prof．HUJunhua Supervisor：Assoiate Abstract Citmsbacterial Xanthomonas canker(CBC)disease，causedby axonopodis oneofmostseriO