植物XRN4基功能初步研究.pdfVIP

摘要 酶家族，在生物体许多生理过程中起重要作用。酵母中存在两种Ⅺ酬酶，分别 A测4与酵母)(】刚1的同源性较高，定位于细胞质。近年研究发现，细胞质定 位的XlⅢ4在病毒与寄主互作中起重要作用，可参与病毒lⅢA的复制和重组。 烟草植株中的增殖，表明植物XRN4可能还参与了植物抗病毒防御过程。 为深入分析植物XI矾4在抗病毒过程中的作用以及利用这种作用开展抗病 毒转基因植物研究，我们克隆了水稻的OsXl州4，并对其功能开展了初步研究。 克隆得到osXlⅢ4的全长阅读框。序列分析表明os)(1瑚4阅读框全长2968 bp， 编码988个瑟，预计分子量112．5 59．22％的同源性，同时定位分析表明osX】必4蛋白定位于本氏烟的细胞质内， 表明克隆的序列是定位于细胞质的水稻XRN4。我们分析了OsXRN4在烟草中瞬 时过表达对TMV侵染的影响，结果发现OsXl州4的瞬时过表达导致了病毒复制 量的增加，这与我们的预期结果相反。进一步研究发现，osⅪⅢ4的瞬时表达导 致了烟草体内同源Ⅺ斟4基因的沉默。据此我们推测，与预期不一致的结果可能 是由于OsⅪ州4过表达与№Ⅺ嫩4沉默同时不同程度的发生所导致的。这也说 明利用瞬时表达系统不能分析OsⅪⅢ4表达对病毒侵染的影响。对此，我们利 用遗传转化手段将OsXl悄4基因转入烟草，拟对转基因烟草进行抗病毒功能分 析。现已获得2l株经PCR、lmPCR检测呈阳性的转基因植株，并已将部分To 代种子播种，进一步检测后用于抗病毒研究。 本文开展植物X】[州4参与抗病毒活性的功能研究，表明植物体在对抗病毒侵 染过程中可能存在除RNA沉默机制之外的更多的抗性途径，加深了人们对于病 毒．植物互作机制的理解。如果能对这些抗病途径加以利用，将有助于为抗病毒 转基因植物育种提供新的研究思路。 关键词：NbⅪ州4：osxRN4：转基因烟草 Abstr．act The r01esi11 key 5’-3’exoribonuCle嬲es(XltNs)playm觚yphysi010萄cal XlⅢsa佗f0狮d process懿．Two i11勋cc^口阳唧7c豁∞例西砌岛n锄edⅪⅢ1锄d mr∞XRNsare XI乇N2瓜atl，while id％tmed蜀rom彳．珐口西．口舶，n锄edAt)@N2， AtⅪ州3锄dAtXIⅢ4．A11AtXRNscontaillme X】之N-1il(e typical sequ锄c黜，but AtⅪ斟2 t0 XRN2／Ratl锄d10叫izesat肌cle盯．ACI(IiN4 h嬲伊eat贸shil撕tyye鹊t t0 XI斟l觚d10caJizest0 workreVealed h船伊eatsiIIlilarityyeaSt c”0pl嬲m．ReCcnt 也at iIl illtemctionbctw咖hoSt鲫dVirus如de仔bctcd cytopl踟icⅪU崎spanicipatcd 0n merecombinationof d锄ons倾tedmat of№砌M virus．Herc，we sil髓ciIlg facilitatedtllein触ion XIⅢ4 of乃6口c∞mo跚fc订，．淞