有丝分裂细胞周中核小体的解离模式与组蛋白甲基化的动态维持.pdf

摘要 组蛋白八聚体与DNA包装形成的核小体结构是真核生物染色质的基本结构单 元(Kornbe唱and 生物体内的所有细胞具有相同的遗传信息——DNA。多细胞生物使用各类染色质修 饰将单一的基因组编辑成为数百种不同细胞特有的表观基因组。保证染色质状态在 细胞世代之间以合适的方式传递，对生物个体发育以及成体的稳态具有重要意义， 染色质状态继承的混乱可能导致多种发育紊乱或者疾病。由此表观遗传信息继承的 分子机理受到研究者的普遍关注。除此之外，与遗传信息的高度稳定性不同，表观 遗传信息具有一定程度的可变性和可逆性。表观遗传信息的继承或许无需如DNA 复制一样具有精确性。 DNA与组蛋白的修饰是表观遗传信息的重要组成部分。新合成的DNA链以类 似半保留复制的方式重建DNA甲基化模式(Ⅺose锄dB矾，2006)。然而组蛋白修 饰是如何在有丝分裂细胞周期中传递给子代细胞的尚不清楚。为了解决这个问题， DNA复制偶联的核小体解离与重组模式必须首先被澄清。我们借助诱导表达体系， 素标记的质谱定量技术，我们以高分辨率的模式检测了这些纯化到的单核小体中每 种的组蛋白的新、旧构成。令人惊讶的是，尽管绝大多数(H3．1．H4)2四聚体在细胞 离可以通过阻断DNA复制偶联的核小体组装得到抑制，这证明1．DNA复制不相关 的H3．3组装途径主要通过同时装配两个H3．3．H4二聚体完成。2．尽管一定程度的 组蛋白赖氨酸甲基化修饰在转录激活、基因沉默、以染色质形成以及DNA损 伤修复等过程中发挥重要作用。然而对组蛋白甲基化整体水平变化的认识仍然缺 乏。借助稳定同位素标记与质谱定量技术，我们对处于有丝分裂周期中组蛋白甲基 化的重建以及非循环细胞中甲基化水平的保持进行了全面分析。我们的研究发现： 1．组蛋白甲基化的整体水平在S期因DNA复制而打破，并在此后的整个细胞周期 中逐步重建：2．尽管整体水平在细胞进入下一个S期前恢复，新、1日组蛋白上甲基 化修饰的丰度具有明显差异；3．在非循环细胞中，各种甲基化水平会最终进入平台 期；4．甲基转移酶活性的限制和甲基基团的动态置换均对非循环细胞中组蛋白甲基 化整体水平的保持做出贡献。综上所述，我们的提出表观遗传修饰的保持具有一定 的灵活性，而无需在特定位点精确重现。 关键词 表观遗传继承、核小体解离、组蛋白甲基化 2 Abstract are intooct锄ericcore with In砌(孤yoticceIls，llistones DNA packaged p枷cles to aroundfoml basicunitsof wr印ping nucleosomes，tlle adultanimalcontai邶oVer200di虢rentcell of memh嬲 Thomas，1974)．An types，eaCh stmctureanddistinct afew specialized oft11eSecells sallle iIlfo肌ationencoded exceptions，all car巧nlegenetic byDNA． utilise Multicellular cllr．omatinmarksto衄lslateone into orgaIlisms singlegeIlome