植酸酶黑曲霉工菌的构建.pdfVIP

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2015-11-01 发布于贵州
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植酸酶黑曲霉工菌的构建.pdf

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曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼舅曼曼曼曼曼曼曼曼L：’V--‘do曼目录中文摘要……………………………………………………………………………………I 英文摘要…………………………………………………………………………………．III l前言……………………………………………………………………………………．．1 1．1研究目的与意义……………………………………………………………………．1 1．2文献综述……………………………………………………………………………2 1．2．1植酸酶的来源…………………………………………………………………．2 1．2．2植酸酶的性质…………………………………………………………………．3 1．2．3植酸酶的分类…………………………………………………………………．6 1．2．4植酸酶的应用…………………………………………………………………．7 1．2．5植酸酶的表达系统研究进展…………………………………………………一7 1．3本研究的主要研究内容……………………………………………………………9 2材料与方法……………………………………………………………………………．10 0 2．1材料……………………………………………………………………………………………………………1 2．1．1菌种及载体……………………………………………………………………．10 2．1．2试剂及酶类……………………………………………………………………．10 2．1．3常用试剂的配置………………………………………………………………．10 2．1．4培养基的配制…………………………………………………………………．13 2．1．5主要实验仪器…………………………………………………………………．13 2．2实验方法…………………………………………………………………………．．13 2．2．1黑曲霉基因组DNA的提取……………………………………………………13 2．2．2基因克隆与扩增………………………………………………………………13 2．2．3根癌农杆菌介导的黑曲霉的遗传转化………………………………………．．16 6 2．2．4酶活性测定……………………………………………………………………1 2．2．5重组植酸酶菌株的mRNA水平表达鉴定……………………………………．17 2．2．6在线软件分析植酸酶的氨基酸序列及蛋白质特征……………………………19 3结果与分析……………………………………………………………………………．20 3．1黑曲霉p砂基因的表达载体的构建………………………………………………．．20 3．1．1 phy基因的扩增结果……………………………………………………………20 3．1．2黑曲霉表达载体pSZHG-phy的构建…………………………………………．23 3．2农杆菌介导的黑曲霉菌丝体遗传转化……………………………………………．24 3．2．1表达载体pSZHGophy导入农杆菌……………………………………………24 3．2．2农杆菌介导黑曲霉菌丝体的转化……………………………………………．．25 3．3植酸酶在黑曲霉中的表达检测……………………………………………………28 II AbstractAbstractMainMedium……………………………………………………………………………………………．13MateriaIsMethods……………………………………………………………………………………………．1Methods……………………………………………………………………………………………………………13mRNAmedicatedVetors……………………………………………………………………………………………10DNADetectionblastTheTheTheTheGeneralGenomevectorvectorCONTENTSChinese……………………………………………………………………