二、三和四倍体鳟Oncorhynchus mykiss精子生物学研究.pdfVIP

摘要 摘 要 虹鳟Oncorhychus 为世界上广泛养殖的鱼类。随着人们对优良水产品的需求不断增加，多倍体的生产及养殖得 到研究者的关注。大多数三倍体鱼类含有三个染色体组，因其染色体配对紊乱而产生非整倍 体配子，导致性腺发育受阻，将用于性成熟消耗的能量有效用于躯体的增长。但已有研究表 明，三倍体雄性虹鳟可产生少量功能性的精子，因此三倍体精子产生机制和基本生物学特性 成为研究者感兴趣的话题。而四倍体可作为三倍体生物学制种的亲本，使得四倍体也成为水 产养殖的热点。 本试验分别利用流式细胞术、光学显微镜、扫描电镜、荧光显微镜等对二、三和四倍体 虹鳟的精液体积、精子倍性、活力、密度、形态结构、存活率以及利用二倍体雌性虹鳟杂交 三倍体雄性虹鳟胚胎倍性和发育状况进行研究，对三、四倍体虹鳟的精子倍性和形成机制、 精子活力与密度关系及2n-?-×3n6胚胎的存活进行探讨，为多倍体鱼类繁殖研究提供理论基 础。试验结果表明： 1．虹鳟三倍体和四倍体红细胞及细胞核体积明显大于二倍体，其细胞和细胞核体积分 别为二倍体的1．54、1．57倍和1．65、1．87倍，与预期理论值1．5倍和1．74倍差异不显著。 2．通过流式细胞术对精子、杂交胚胎(2n旱×3n 6)的相对DNA含量来分别鉴定精子 倍性与利用光学显微镜测定精子头部体积辨别精子倍性的结果：基本一致，即虹鳟三倍体产生 1．5n和3n两种类型的精子，其中以1．5n精子为主。三倍体虹鳟因具有“六倍性”，基本可以 完成正常的减数分裂而形成大量的1．5n精子；但由于长期的进化作用，第三套染色体因自身 存在同源染色体片段而自身联会，导致3n精子产生。四倍体虹鳟因含有偶数染色体组，能 够完成正常减数分裂形成2n精子。 3．二倍体虹鳟的产精量显著高于三倍体和四倍体，且四倍体的产精量明显大于三倍体。 4．未激活的精予尾部笔直，在精液中处于静止状态。当用适当体积的激活剂激活后， 精子立即开始剧烈运动，随着活动时间的延长，活动强度下降。，三种倍性虹鳟的精子激活后 其运动方式基本一致，均是快速泳动——回旋运动——颤抖～一停止。 5．三倍体和四倍体虹鳟精子快速泳动时间和寿命差异不显著，但均显著高于二倍体虹 鳟，这可能是由于三倍体和四倍体精子头部大，相应的中段较：赶，其中段所含的线粒体数目 多、体积大，因而能够贮存或获得更多的能量。二、三和四倍性虹鳟的精子密度与快速泳动 时间和寿命分别呈线性相关性，经多重比较分析显示二倍体虹鳟精子密度与快速泳动时间和 寿命明显相关，但三倍体和四倍体相关性不明显，且与二倍体精子相比较，三倍体和四倍体 精子头部大小变化较大，尤其是三倍体虹鳟产生的精子表现更为明显，这可能是导致精子密 度与快速泳动时间和寿命相关性差的原因。 6．二倍体虹鳟精子密度显著高于三倍体和四倍体，但三者存活率基本一致，由此推测 在精原液中，二倍体精子密度高，呼吸作用产生的C02浓度大，使环境酸度增加，麻醉抑制 精子活动，使得三倍体和四倍体精子的存活率与二倍体相似。 7．虹鳟二倍体雌性与三倍体雄性杂交胚胎受精率、发眼率和孵化率显著低于二倍体对 照组，其可能原因是非整倍体细胞的遗传缺陷导致的，同时异倍性的细胞结合产生的非整倍 东北农业大学理学硕士学位论文 体豉嵌合体细胞在基因或生理上存在一定的障碍。由此导致2n早×3n古杂交胚胎的大多畸 形，在上浮期间已经全部死亡。 关键词虹鳟；三倍体；四倍体；精子生物学；杂交胚胎 Abstract A ontile of ComparativeStudy Biology from and Spermatozoa Diploid，IYiploid Rainbow TetraploidTrout Abstract Rainbowtrout Thecu