四大类原癌基因大鼠原始卵泡启动生长中作用的初探.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 采用基因芯片技术，初步探究与细胞增殖、凋亡和信号转导有密切关系的 四大类主要原癌基因在原始卵泡启动生长中的作用。 方法： 200ng／ml生长分化因子．9(GDF一9)、10≤mol／L雌二醇(E2)、10巧mol／L孕酮(P4) 白对照，培养8d后，石蜡包埋切片，HE染色，观察各级卵泡形态，并统计分 析各级正常卵泡数，初步观察不同发育阶段和不同因子作用下的卵泡发育情况。 组表达谱芯片研究各组卵巢组织基因表达的差异，探讨四大类原癌基因在原始 卵泡正常启动生长过程中的变化，同时分析EGF、GDF．9、E2、P4在调控原始卵 泡启动生长中的作用与四大类原癌基因的关系。 结果： (1)经组织形态学的比较、各级正常卵泡数量的计算，观察到与单纯 GDF．9，均能进一步促进原始卵泡的启动生长，而在 EGF和200ng／ml 50ng／ml E2和10一mol／LP4，均会抑制原始卵泡 Waymouth培养体系中分别加入10～mol／L 的启动生长。 (2)芯片结果显示；与新生组比较，8d空白对照组有3540个基因表达发生 达上调，其中包含1个原癌基因A2m，79个基因表达下调，其中包含1个原癌 但是均未发现表达差异的原癌基因；E2组有108个基因上调，127个基因下调， 其中包含1个表达下调的原癌基因Mycn。 结论： II 摘要 (1)在原始卵泡正常的启动生长过程中，一部分原癌基因参与了该过程的调 控，如：A2m，F．gf,-，Fgt7，Myc，Reln，Kit。 (2)EGF对于原始卵泡启动生长的促进作用可能与原癌基因A2m的表达上调 有关。GDF一9、E2、P4对于原始卵泡启动生长的调控作用，可能不是由原癌基因 介导的。 关键词：原始卵泡；原癌基因；基因芯片；表皮生长因子；生长分化因子．9； 孕酮；雌二醇 ★本研究工作受国家自然科学基金和江西省主要学科学术和 技术带头人培养计划(2008)u资助。 III Abstract ABSTRACT objective： Theaimofthis isto theeffectsoffour of studypreliminaryexplore categories areinvolvedincell and majorproto。oncogenes，which proliferation，apoptosissignal theinitiationof follicles． transduction，during growthprimordial Methods： werecollectedfrom SD 8dculturedinthe (1)Ovaries rats，after 2-day．old culture was whichtreatedwitheither Waymouthsystem 50ng／ml growth