树鼩调节性T细(Treg)CD4CD127基因的克隆及表达.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 人类乙型肝炎病毒HBV可特异侵染人类肝组织，引起急性或慢性乙型肝炎，从而诱发肝 硬化、肝癌。目前，世界范围内约有20亿HBV感染引起的肝炎患者，其中约有3．5亿患者转 化为慢性乙型肝炎，而世界每年约有60万乙肝患者死亡。我国作为发展中国家，同时也是乙 型肝炎的高发区，全国约有l亿乙肝病毒携带者，而慢性乙型肝炎患者更是高达2000万人。 虽然，目前预防HBV感染的疫苗已相当成熟。但由于HBV侵染宿主的范围狭窄，在选择实 验动物开展相关研究时存在较大限制，导致目前对HBV的侵染机制知之甚少，特别是慢性乙 型肝炎的发生机制，从而无法制定有效的治疗策略。树昀作为灵长类的近亲，由于其对肿V 易感且具有个体小、易于饲养等优点，现已成为HBV研究的理想动物模型。目前，针对树购 免疫系统，特别是一些免疫细胞的标志研究较少，这严重阻碍了树晌作为一种理想的HBV感 染动物模型的进一步应用。对树昀免疫系统的研究将有可能揭示HBV与宿主间的相互作用， 有助于乙型肝炎的预防和治疗。大量实验证明调节性．r淋巴细胞(Treg)与各类癌症的发生 有着密切的关系，而树踟mg细胞的相关标志分子的编码序列却未有报道。因此，本实验以 码序列，并确定了原预测序列中的未知片段。通过ClustalW等软件对其序列和分子特征进行 分析，发现树晌CD4、CDl27氨基酸序列都存在自身的一些保守性序列且都表现出与人、猴 三维空间建模，结果显示树晌CDl4、CDl27有着与人相应分子相似的胞外域结构，但在部分 表面电荷分布、糖基化位点和二硫键数目上存在差异。随后。我们利用慢病毒载体对树晌CD4 的编码序列进行了真核表达，获得了能够高效表达树嗣CD4的HElc293T细胞。本试验首次 今后树嗣CD4、CDl27单克隆抗体制备及功能研究提供了必要条件，同时也为树嗣HBV感染 模型的最终建立奠定了基础。 关键词：树昀； HBv；调节性T细胞； cD4；cDl27；克隆；真核表达 Abstracf Abstract H1瑚an BVinls(HBV)c锄iIl触thuII_啪ljVcr acuteorc抽DIlic h印atitis tissl圮specifically，causing liVerc锄c既At 2billionHBV cimlosis，锄d h印acitisB，Ⅵ惋chiIlducing pres∞t，me他a代about 枷硫ted illtlle 350Illillionch河c B pati饥ts world，i11cluding hepatitis n伽1y600，000 pati叽ts，锄d B died％ch of h弱a mcid∞ceof hcpatitis ycaL舡∞e cour嘶嚣，ClliIla pa石跏ts d州e10ping lligll aur Bvi九ls砌∞ti∞．n饿玳about∞ehundred砌lionHBVc硎懿in h印alitis c0Ⅲ1咄 20IIlilliondhDmc B Vaccine HBViIl=ktion pati∞坞．1k is轴cccssM， i11cluding h印atitis agaillst but n舯