怀地黄活性内生的分离鉴定及其抗菌、抗肿瘤活性的研究.pdfVIP

IIIIⅢI f㈣删『『f『|iiii『『『f『iiilil㈣lIIIII『『|『『I f Y1 734761。 摘要 本实验选取怀地黄作为实验材料，应用平板切块分离的方法，从怀地黄中分离出130 株内生菌，并对分离出的内生菌进行进一步的抗菌、抗肿瘤等方面的研究，为怀地黄行 业的发展提出一条新的发展方向。研究的所得结论有以下几个方面： (一)从怀地黄中共分离出内生菌130株，其中内生细菌居多，其次为内生真菌，内 生放线菌最少，分别占分离菌数的51．5％、28．5％和10％；怀地黄在时间和空间分布上， 块根中分离的内生菌要明显的多于叶片中分离的内生菌，08年9月育苗期分离的内生菌 要少于09年3月成熟期分离的内生菌。对分离的内生菌进行抗菌活性菌株初筛，筛选 出具有抗菌活性的菌株共31株，占分离菌株的23．84％，具有广谱抗菌性的菌株共8株， 占有抗菌活性菌株的25．8％；这些抗菌活性菌株在空间分布上，块根中分离的抗菌活性 菌株要明显多于从叶片中分离的抗菌活性菌株；在时间上分布，09年3月分离的活性菌 株要明显多于上年9月分离出的内生菌株。同时筛选出一株具有产生红色素能力的内生 真菌2．10号。 (二)将初筛出的8株具有广谱抗菌活性的内生菌和具有产生红色素能力的内生真 菌2-10号进行液体摇瓶培养，并提取发酵活性产物，其发酵活性产物对3种供试菌的 拮抗作用各不相同，其中2-2号菌的效果最好，在大肠杆菌和金黄色葡萄球菌平板上均 号菌在大肠杆菌平板上抑菌圈直径最大，达到26．Omm。利用3种不同溶剂提取发酵液和 菌体中抗肿瘤活性物质，不同溶剂相对Ec9706食管癌细胞的抑制效果各不相同，2—2 号菌发酵液的脂溶相和醇溶相对Ec9706食管癌细胞的抑制效果较为明显，分别达到了 2—10号菌的两种不同培养基的醚溶剂提取相，其抑制率分别达到了28．5％和27．5％。综 合前面结果发现2-2号和2-10号内生菌具有很好的抗菌、抗肿瘤活性，对其应该做进 一步的研究。 上产生紫红色色素物质，并且经液体发酵培养提取色素，色素在多种条件下性质较稳定， T 怀地黄活性内生菌的分离鉴定及其抗凶、抗肿瘤活性的研究 psa]lfo tae)。 关键词：内生菌，怀地黄，抗菌，抗肿瘤 II ABSTRACT LiboschmWaSchosenasthematerialsfor of Rehmannia separationentophtyes．Byplatting glutinosa antibiosistest isolatedformRehmanniaLiboschm．The 30strainsof were glutinosa chture，1 entophytes weretentative researchoutanew andthe testofthe130strainsof point antitumor entophytes studied，the