渗透胁迫下拟南胞内Ca2+增加缺陷突变体与其野生型蛋白质组变化的研究.pdfVIP

渗透胁迫下拟南芥胞内Ca2+增加缺陷突变体与其野生型蛋白质组变化的研究 摘要 干旱和盐渍是最常见且对植物危害严重的两个非生物胁迫因子，其作用的 实质都是引起植物细胞的渗透胁迫，而胞内ca2+浓度的瞬时升高是植物响应渗 透胁迫中检测到的最早事件之一。研究证明，胞内Ca2+浓度的升高引发的钙信 导，进而在细胞内引起一系列的生化反应以抵抗或适应各种逆境胁迫。但有关 植物如何在分子水平感受外界信号，并将这些信号转换为胞内信号的环节上仍 知之甚少。 本研究以PeiLab提供的拟南芥突变体ci04(该突变体为渗透胁迫下胞内 Ca2+增加缺陷型突变体)与其野生型Coi／AQ为研究对象，利用双向电泳技术 结合质谱鉴定技术对这两种植株进行蛋白质组分析。 实验结果显示：(1)ci04中积累有大量的抗逆性物质，主要包括谷胱甘肽 ．S．转移酶类、植物凝集素类、脂氧合酶、乙烯受体以及涉及精氨酸、谷氨酸、 丝氨酸、半胱氨酸的转氨酶类和甲基、酰基转移酶类等。经胁迫处理后，一些 ATP酶类、超氧化物歧化酶类、植物凝集素类等的表达量上升了；(2)Col／AQ 因胁迫刺激表达量上升的蛋白质主要包括有脂氧合酶、延伸因子、转录因子、 谷胱甘肽．s．转移酶类、甲酸脱氢酶、涉及丝氨酸、谷氨酸、半胱氨酸代谢的酶 类以及涉及蛋白修饰的酶类，而同样的蛋白质点在胁迫前后的ci04中基本上没 有发生变化。胁迫刺激使这些蛋白质在Col／AQ中表达上升了，但其表达量仍 低于或等于ci04的表达量；(3)与ci04相比，Col／AQ特异性表达了谷草转氨 酶，并在渗透胁迫的刺激下，该酶表达量上升；(4)在胞内Ca2+增加的情况下， Col／AQ特异表达乙酰CoA乙酰基转移酶、ABC转运蛋白和转录因子MYBl7。 由实验结果可知：(1)正常生长环境下的ci04积累有大量的抗逆性物质， 可能该突变体为抗逆性较强的植株；(2)Col／AQ中因受胁迫刺激而表达量上升 mM 的蛋白质可能与Ca：+信号感受和转导存在着一定关系；(3)因ci04在500 山梨醇的胁迫处理下胞内Ca：+的增加不明显，由此推测因该胁迫刺激引起ci04 部分表达量上升的蛋白质，可能与其它不依赖cE+的信号转导通路有关；(4) 渗透胁迫下拟南芥胞内Ca2+增加缺陷突变体与其野生型蛋白质组变化的研究 在胞内Ca2+增加的情况下特异性出现的CoA乙酰基转移酶、ABC转运蛋白和 转录因子MYBl7，以及Col／AQ特异表达并因胁迫刺激表达量上升的谷草转氨 酶，这四种蛋白质可能与拟南芥响应渗透胁迫时Ca2+信号的感受和转导有一定 的关系。 关键词：双向电泳；拟南芥；PEG；渗透胁迫 2 渗透胁迫下拟南芥胞内Ca2+增加缺陷突变体与其野生型蛋白质组变化的研究 Abstract mostcommonabioticstressorsthatoftencaLlse harmto andsaltarethe great Drought of Ca2+isone stress．Theinstantaneousofconcentration osmotic cytosolie by increasing plants Canbedetectedinthis havebeen thatthecd+ ofthe eventsthat processses．It proved primary is andtransmittedthreemain signalamplified by signal