《细菌素产生菌的筛选及其编码基因的克隆与序列分析2016年论文》.pdfVIP

细菌素产生菌的筛选及其编码基因的克隆与序列分析 甘祥武，叶志伟，郭心悦，郭丽琼，林俊芳 ，王艳婷，廖腾达 (华南农业大学食品生物技术研究所、华南农业大学食品学院生物工程系，广州 510640) 摘 要 ：细菌素是细菌代谢过程中合成的具有抑菌性质的多肽类物质，它可以广泛地抑制革兰氏阳性菌， 尤其是抑制单增李斯特菌等腐败菌和病原菌，大部分细菌素对热稳定，与食品一起在加热处理时使用依然能 够稳定存在，并可在人体内进行生物降解和消化，对健康无害。利用分子克隆的方法在大规模筛选细菌素中 具有快速准确的特点，根据已知的细菌素DNA序列设计保守的PCR引物，在从杏鲍菇子实体中分离得到56 株乳酸菌中，有22株克隆出目的条带，其中只有一个样品稳定性好 ，经鉴定该样品的乳酸菌株为乳酸乳球菌 (Lactococcuslactis)。对克隆的细菌素Nisin-like基因测序结果表明该基因序列全长 174bp。生物信息学分析 显示该基因编码57个氨基酸，分子量大小5924．93Da，等电点9．23，二级结构主要由a一螺旋和 一折叠股组 成，与报道的有所不同，可能是新的细菌素。 关键词：乳酸乳球菌；Nisin-like基因；分子筛选；序列分析 中图分类号 ：TQ456．6 文献标识码：A 文章编号：1006—2513(2015)05—0l84—06 J 0 … 0 I ‘ I - I 一 ‘ I 一 i 。 ‘ creeningofthebacteriocin-producingbacteriaandthecloningand sequencinganalysisOfitSbacteriocingene GANXiang—wn，YEZhi-wei，GUOXin-yue，GUOLi-qiong，LIN Jun-fang ，WANGYan-ting， LIAO Teng-da (InstituteforFoodandBiotechnology，SouthChinaAgriculutralUniversity；DepartmentofBiological Engineering，CollegeofFoodScience，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou 510640) Abstract：Bacteriocinisakindoflower—molecular—weightpolypeptideproducedamongmetabolicprocess．Itcan bewidelyinhibitgram—positivebacterium，especiallytheinhibitionofListeriamonOcytogenesandotherspoilage organismsandpathogenicbacteria．Mostbacteriocinisthermalstableandcanbestaystableinfoodheatingprocess． TheBioinformaticssoftwareswereusedtoanalysisandcomp~ebacteriocingenesanddesigntheoptimalprimers，the genomicDNAfrom 56Lacticacidbacteriawhichseparatedfrom PleurotuseryngiiFruitbodywereusedasthetemplate toclonetheDNA sequenceofNisin—likebacteriocinbyPCR，22strainshadthesamesizetragetbandamongall56 genome，however，onlyonestraincharacterizedasLactococcuslactishasstablesigna1．Theresultofsequencing showsthatthefulllengthofNisin-likegeneis174bp，whichcodedfor57a