新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中AQP1、Na%2b-K%2b-ATPaseα1、NKCC1的蛋白和mRNA表达及其沐舒坦的干预作用.pdf

+ + 新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中AQP1 、Na -K -ATPase α1、NKCC1 的蛋白和mRNA 表达及沐舒坦的干预作用 中文摘要 + + 新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中AQP1 、Na -K -ATPase α1、NKCC1 的蛋白和mRNA 表达及沐舒坦的干预作用 中文摘要 目的：通过建立新生大鼠急性高氧性肺损伤模型及使用沐舒坦干预并与正常新生 大鼠对比：1.观察各组实验动物的一般情况、肺组织的病理学改变；2.研究各实验组 + + 之间肺组织中水通道蛋白-1 （AQP 1）、钠钾ATP 酶α1 亚基(Na -K -ATPase α1) 、钠 + + 钾氯共同转运蛋白-1（NKCC1 ）的表达变化，以探讨AQP 1、Na -K -ATPase α1 、NKCC1 在急性高氧性肺损伤发病机制中的作用；3.探讨沐舒坦对急性高氧性肺损伤是否有保 + + 护作用及是否对AQP 1、Na -K -ATPase α1 、NKCC1 的表达有调节作用，为临床防治 新生儿高氧性肺损伤提供理论依据。 方法：将120 只出生满48 小时的新生SD 大鼠 （雌雄不限）随机分为三组：I 组： 空气对照组；II 组：高氧组（高氧+生理盐水）；III 组：沐舒坦组（高氧+沐舒坦）； I 组新生大鼠置于常压空气中饲养。II 组、III 组新生大鼠置于氧浓度维持在95% 以上的氧箱中饲养。III 组于实验第一天起每日早晚腹腔注射沐舒坦(75mg/kg)各一次。 Ⅰ组与II 组于实验第一天起每日早晚腹腔注射等量生理盐水各一次。 每组按实验时间点分为 1 天、3 天、7 天三个亚组，每组于各实验时间点分别随 机取实验鼠十二只，处死取材检测以下指标： （1） 肺泡灌洗液中总蛋白含量； （2 ） 取左肺称取其湿、干重，计算肺湿/干重比； （3 ） 肺组织病理学观察：取右上肺行病理切片后观察肺组织病理改变； + + （4 ） 肺组织AQP 1，Na -K -ATPase α1 ，NKCC 1 蛋白及mRNA 含量测定：取 部分肺组织匀浆提取蛋白通过western blotting 方法分别测定其蛋白含量；另取部分肺 组织提取RNA，通过RT-PCR 方法分别测定其mRNA 含量。 I + + 中文摘要 新生大鼠高氧性肺损伤肺组织中AQP1 、Na -K -ATPase α1、NKCC1 的蛋白和mRNA 表达及沐舒坦的干预作用 结果：1.各组实验动物一般情况观察：空气组中的实验动物反应好，饮食佳，生 长发育正常，无死亡。高氧组中的实验动物高氧暴露1 天时反应好，肤色红润，离氧 后无呼吸困难表现出现。高氧暴露三天后实验动物反应尚可，脱离氧气后呼吸频率稍 加快。高氧暴露七天时实验动物精神萎靡，少吃少动，离氧后出现呼吸急促，唇色发 绀，个别死亡。沐舒坦干预组的实验动物一般情况较高氧组有改善，无实验动物死亡。 2.肺组织病理学改变：空气组大鼠各时相肺组织未见病理改变，肺泡大小均一、 肺泡腔内无液体渗出及细胞浸润。高氧组实验动物于高氧暴露1 天时，肺泡结构完整， 肺泡内可见少许红细胞，无明显渗出；3 天后可见血管充血、肺间质水肿，肺泡内红 细胞、炎症细胞浸润；7 天时则出现肺组织水肿，结构紊乱，肺泡内出血、液体渗出、 炎症细胞浸润明显加重。沐舒坦组的肺组织病理改变，肺泡腔内液体渗出，红细胞、 炎性细胞浸润较高氧组明显减轻。 3.肺组织湿/干重比（W/D ）：实验1 天时，各组实验动物的肺组织W/D 无明显 差异 （P ＞0.05 ）。实验3 天、7 天时，高氧组实验动物的肺组织W/D 较空气对照组 有升高，